[发明专利]一种从枸杞叶中同时制备芦丁、槲皮素化学对照品的方法

权利要求书

1.一种从枸杞叶中同时制备芦丁、槲皮素化学对照品的方法，包括以下步骤：

⑴微孔树脂除杂：

按常规方法制得的枸杞叶醇提物用其质量5~10倍的体积分数30%~60%甲醇溶液溶解，过滤得到滤液A，该滤液A上微孔树脂柱分离后依次用2~5倍柱体积的水、20~35%甲醇溶液、70%甲醇溶液进行台阶梯度洗脱，收集70%甲醇水洗脱物，该甲醇水洗脱物经减压干燥，即得芦丁、槲皮素粗品；所述枸杞叶醇提物与所述微孔树脂比例为1 g：30 mL；

⑵硅胶柱色谱富集：

将所述芦丁、槲皮素粗品经硅胶柱色谱分离，用3~5倍柱体积的氯仿-甲醇-水的混合溶剂洗脱，按每份500 mL收集馏分，并经薄层色谱检测，其中展开剂为氯仿-甲醇-水混合溶剂，显色剂为体积浓度10%的浓硫酸乙醇溶液，合并Rf值为0.3~0.5的馏分；所述Rf值为0.3~0.5的馏分经减压干燥即得棕黄色粉末状的芦丁、槲皮素类组分；所述硅胶柱的尺寸为30 mm~60 mm×60 mm ~100 mm；

⑶反相液相制备色谱精制：

所述芦丁、槲皮素类组分用其质量10~20倍的体积分数为40~60%的甲醇溶液溶解，然后配制样品浓度为50.0~100.0 mg/mL，经0.45 μm微孔滤膜过滤，得到滤液B；该滤液B采用高效反相液相制备色谱柱进行分离，并经检测波长为254 nm的紫外检测器检测，收集制备色谱图中两个主要的色谱峰馏分，该色谱峰馏分经减压干燥即得黄色粉末状的芦丁与槲皮素对照品。

2.如权利要求1所述的一种从枸杞叶中同时制备芦丁、槲皮素化学对照品的方法，其特征在于：所述步骤⑴、所述步骤⑵和所述步骤⑶中减压干燥的条件均是指真空度为0.06~0.09 MPa，温度为50~70 ℃。

3.如权利要求1所述的一种从枸杞叶中同时制备芦丁、槲皮素化学对照品的方法，其特征在于：所述步骤⑴中微孔树脂柱是指HP20SS型树脂柱或MCI型树脂柱。

4.如权利要求1所述的一种从枸杞叶中同时制备芦丁、槲皮素化学对照品的方法，其特征在于：所述步骤⑵中氯仿-甲醇-水混合溶剂是指将氯仿、甲醇、水按8：2：0.2~7：3：0.5体积比混合均匀而得。

5.如权利要求1所述的一种从枸杞叶中同时制备芦丁、槲皮素化学对照品的方法，其特征在于：所述步骤⑶中反相液相制备色谱分离的工作参数是指色谱柱柱长250 mm、尺寸50 mm，反相液相制备柱固定相为10 μm耐纯水C18或常用C18，流动相为体积分数45%~55%的甲醇溶液，进样体积为10mL，流速为60 mL/min。