[发明专利]一种利用生物元件检测痕量二价铜离子的方法

权利要求书

1.一种利用生物元件检测痕量二价铜离子的方法，其特征在于：取缓冲液与荧光铁载体溶液P在水环境下于室温下反应5-10min，所得反应液A,待用；再取缓冲液与荧光铁载体溶液P在待测样品的环境下于室温下反应5-10min，所得反应液B,待用；收集420nm-600nm波长范围内反应液A与反应液B的不同发射光谱，通过光谱计算出荧光猝灭率α，并将其依据标准曲线计算样品中二价铜离子的浓度；所述缓冲液为1-80mM的羟乙基哌嗪乙硫磺酸缓冲液，pH 7-8。

2.按权利要求1所述的利用生物元件检测痕量二价铜离子的方法，其特征在于：所述荧光铁载体溶液P获取的具体步骤为：挑取铜绿假单胞菌的单菌落培养在培养基YK中，于30℃下培养12h后，将菌液置于10mL离心管中离心吸取上清液；上清液为荧光铁载体粗产品，粗品经固相洗脱铜柱纯化，获得具有410nm荧光激发波长的荧光铁载体溶液P。

3.按权利要求2所述的利用生物元件检测痕量二价铜离子的方法，其特征在于：将试剂B与荧光铁载体粗产品混匀后在固相洗脱铜柱上静置5-10分钟后，经去离子水冲洗去除试剂B，荧光铁载体粗产品固定在吸附柱上，然后加入试剂C将荧光铁载体洗脱下来，收集洗脱液，纯化得具有410nm荧光激发波长的荧光铁载体溶液P。

4.按权利要求3所述的利用生物元件检测痕量二价铜离子的方法，其特征在于：所述洗脱液为0.02M Na2HPO4，0.5M NaCl，0.05M EDTA，pH 7.2；试剂B为：0.02M Na2HPO4，1M NaCl,pH 7.2；试剂C为：0.02M Na2HPO4，1M NH4Cl，pH 7.2。

5.按权利要求2所述的利用生物元件检测痕量二价铜离子的方法，其特征在于：所述培养基YK成分为6-10g K2HPO4，3-5g KH2PO4，1-3g(NH4)SO4，0.1-0.4g MgSO4，4-5g琥珀酸，去离子水定容到1L，调PH 7.0，高温高压灭菌。