[发明专利]一种长春地辛的纯化方法

说明书

技术领域

本发明涉及长春地辛的纯化技术，特别是涉及一种长春地辛的纯化方法。

背景技术

长春碱类化合物是从夹竹桃科植物长春花(Catharanthus roseus)中提取的生物碱，具有抗肿瘤活性，主要用于治疗非小细胞肺癌，小细胞癌，乳腺癌，恶性淋巴瘤等恶性肿瘤。现已正式用于临床的有长春碱(vinblastine)、长春新碱(vincristhle)、长春地辛(vindesine)及长春瑞宾(vinorelbine)。其中长春地辛是对长春碱G环的3、4位修饰而得到的典型4-去乙酰-C-3酰胺衍生物，可与细胞内的循环糖蛋白—转铁蛋白形成共价键，从而破环其与铁的结合导致肿瘤细胞凋亡，结构式如下。

国内主要研究长春地辛化合物的剂型改造、药物组合，对其分离纯化方法的研究较少。中国专利CN101638413公开了一种长春碱类生物碱的分离纯化方法，在氧化铝柱上预处理样品后，再用高效液相色谱进行分离纯化，最后重结晶精制样品，覆盖长春碱、长春新碱、长春地辛或长春瑞滨等生物碱。该工艺属小试工艺且步骤繁多，成本高，不适宜工业生产。

发明内容

针对长春地辛纯化效率低、工艺复杂等难题，本发明的目的是提供一种高纯度、操作性强、适合工业化生产的长春地辛的纯化方法。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

(1)采用有机溶剂A溶胀后的硅胶为色谱柱填料制备色谱柱；

(2)将长春地辛粗品有机溶剂A溶液加入上述色谱柱；

(3)采用梯度淋洗的方法对色谱柱进行洗脱，依次用体积比逐渐减小的有机溶剂A/有机溶剂B混合液作为洗脱液进行洗脱，收集主成份流出液，最后洗下残留物；

(4)减压浓缩回收洗脱剂，得到高纯度长春地辛90wt％以上，收率为40～80％。

在上述制备方法中：

步骤(1)中，所采用硅胶为100～400目，干硅胶用量为5.9～6.1kg；

步骤(1)中，所述有机溶剂A为二氯甲烷、正丁醇、甲基异丙酮、乙酸乙酯、氯仿、二氧六环中的一种；

步骤(2)中，长春地辛上样量为1～5wt％，进料量为制备色谱柱体积的1～10％；

步骤(3)中，所述有机溶剂B为丙酮、乙腈、二甲基甲酰胺、甲醇、二甲亚砜中的一种；

步骤(3)中，采用恒压恒流泵进洗脱剂，洗脱剂依次为溶剂A：B＝99：1～80：1、溶剂A：B＝60：1～45：1、溶剂A：B＝40：1～20：1，洗脱剂用量为柱体积的200～500％，洗脱流速为每分钟洗脱柱体积的1～10％；制备色谱柱运行的压力为0.1～0.7MPa；

步骤(3)中，洗脱液分段收集，收集分两段，第一段收集溶剂A：B＝60：1～45：1馏分，为含量较低的长春地辛洗脱液；第二段收集溶剂A：B＝40：1～20：1馏分，主要为高浓度长春地辛洗脱液。

步骤(3)中，采用溶剂A：B＝20：1～5：1洗脱残留物。

本发明以长春地辛粗品为起始原料，通过硅胶制备色谱纯化分离，实现高纯度长春地辛的制备。本发明具有如下优点：

1、产品纯度高，该方法可使长春地辛的纯度达到90％以上，收率为40～80％。固定相稳定，可重复使用；

2、本发明使用的洗脱剂易回收，可反复使用，生产成本低；

3、工艺过程简单，设备一次性投入小，能耗低，可操作性强，适合工业化生产。

附图说明

图1是本发明实施例1采用的长春地辛粗品原料的液相色谱分析图谱。

图2是本发明实施例1得到的长春地辛产品的液相色谱分析图谱。

具体实施方式

实施例1

1)称取5.98kg 300目硅胶，添加氯仿并搅拌，排出硅胶中气泡，然后将硅胶均匀地装到制备色谱中，柱尺寸为Φ20cm×52cm，固定相硅胶压实后，用洗脱剂冲洗2h，得到装好的制备色谱柱；

2)将195g长春地辛粗品(纯度为76.73％)用氯仿溶解，进料，进料量为300ml；

3)采用恒压恒流泵进洗脱剂，先用氯仿：甲醇＝90：1溶剂洗脱2个床层，换用氯仿：甲醇＝40：1溶剂洗脱3个床层并收集洗脱液a，再换用氯仿：甲醇＝30：1溶剂洗脱4个床层并收集洗脱液b，最后换用氯仿：甲醇＝15：1的洗脱液洗脱制备色谱柱中残留物；

4)减压回收洗脱液b，得到长春地辛107.7g，液相色谱检测纯度为99.05％，收率为71.3％。