[发明专利]一种基于柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器测定皮革中全氟辛酸残留量的方法

说明书

技术领域

 本发明涉及产品检测分析领域，具体涉及一种柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器测定皮革中全氟辛酸（PFOA）残留量的检测方法。

背景技术

全氟辛酸（Perfluorooctanic acid，PFOA）分子式为CF₃(CF₂)₆COOH，是PFCs家族中的代表性成员之一。由于其具有优良的疏水疏油性能、高热稳定性、高化学稳定性和高表面活性等性能，作为“三防”表面整理剂广泛地应用于皮革生产中。然而，有研究表明PFOA广泛存在于生物体内和生态环境中，并具有生殖毒性、遗传毒性、发育毒性、免疫毒性和肝脏毒性等多种毒性，已成为引起重视的一种新型持久性有机污染物（POPs）。2004年国内外所关注的“杜邦不粘锅事件”就是PFOA所引起的。欧盟指令中PFOA因被怀疑与PFOS具有相似的危害性也将被列为受限物，而挪威污染控制管理局在2013年已经对PFOA进行了限量使用。因此，皮革及其制品中PFOA含量的检测分析具有重要的现实意义和必要性。

至今，对于皮革及其制品中PFOA的检测分析尚无国家统一标准，浙江省发布的地方标准DB33/T 479-2009《纺织品、皮革中PFOS和PFOA的测定 液相色谱-串联质谱法》可检测皮革中PFOA含量。其它行业或学科已经发展的PFOA检测方法主要有HPLC-MS法、HPLC-MS/MS法、GC-MS法等。鉴于这些方法虽检测灵敏度高，但主要依赖高端分辨仪器，检测成本高，难以普及。选择合适的衍生化试剂以及简单的前处理方法，开发不依赖于昂贵仪器，分析成本低，易于操作和普及的分析检测方法是环境分析化学的重要研究方向之一。

本发明的目的是针对现有技术存在的不足和缺陷，借助于柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测技术相结合，提供一种可测定皮革、人造革及其制品中全氟辛酸（PFOA）的检测方法。本发明所提供的检测方法是通过柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测法实现的，旨在解决现有方法大都依赖于高端分析检测仪器，检测成本高，方法难以普及应用的问题。本方法通过合理选择高效液相色谱测定参数和测试步骤，采用荧光检测器检测，外标法定量，可以实现皮革、人造革及其制品中PFOA含量的测定，具有经济有效、精密度高、抗干扰能力强和检测限低的特点。目前为止，国内外采用柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器分析测定皮革及其制品中PFOA的检测方法检测尚未见文献和专利报道。

发明内容

一种基于柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器测定皮革中全氟辛酸残留量的检测方法，其特征在于所述全氟辛酸(PFOA)残留量的测定方法是通过3-（溴乙酰基）香豆素（3-BrAC）柱前衍生-高效液相色谱-荧光检测器测定的，测定方法具体包括以下步骤：

（1）将待测样品剪碎后置于容器中，加入有机溶剂后再置于超声波清洗仪中超声萃取0.5h~1h，滤出滤液；再加入有机溶剂，重复萃取1次，超声时间缩短为10 min ~20min，再次过滤，合并两次滤液，旋转蒸发仪得浓缩的萃取液；

（2）用乙腈溶解旋蒸瓶中的萃取液，定容至1 mL ~3 mL，涡旋振荡3 min ~10min，用移液枪准确移取至10mL试管中，加入50μL~200μL衍生化试剂，加盖密封后于50~80℃下振摇反应2h~5h，衍生反应结束后迅速冷却至室温，置于通风橱中平衡1 min ~5 min，经0.45 μm有机滤膜过滤至样品瓶中，得待测样液；

（3）根据待测样液中PFOA衍生产物的含量情况，选定浓度相近的标准工作溶液，标准工作溶液和待测样液中PFOA的响应值均应在仪器检测的线性范围内，用高效液相色谱-荧光检测器进行测定，如果样液中与标准溶液在相同的保留时间内有峰出现，则需要确证；经确证分析被测物质的色谱峰保留时间与标准物质一致，则判定待测样品中含有PFOA；

（4）同时用高效液相色谱-荧光检测器按步骤（1）、（2）检测空白样品；

（5）用外标法绘制标准曲线，按下式计算样品中PFOA的含量：

x=(C-C₀)*f /m

式中：x—样品中PFOA的含量，单位为mg/kg；

C—由标准曲线得到的样液中PFOA的浓度，单位为μg/mL；

C₀—由标准曲线得到的空白试验中PFOA的浓度，单位为μg/mL；

f—检测液的最终稀释比；

m—检测液所代表的试样的质量，单位为g。