[发明专利]一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱及其检测方法

权利要求书

1.一种气质联用检测多溴联苯醚及其代谢物的凝胶色谱柱，其特征在于所述凝胶色谱柱采用如下方法制备：(1)、称取聚苯乙烯凝胶和溶剂，其中每1克聚苯乙烯对应量取5～8毫升溶剂，所述的溶剂为环己烷和乙酸乙酯的混合溶液，将聚苯乙烯凝胶混合于溶剂中，摇匀，然后进行溶胀，溶胀时间大于24小时，溶胀平衡后，倒出上清液以及悬浮颗粒杂质，备用；

(2)、取一支干燥洁净的色谱柱以及一支硅胶软管，将硅胶软管连接在色谱柱的下端出口处，然后向色谱柱内加入占柱体积20～30％的溶剂，静置，直至色谱柱内的玻璃砂芯滤板中无气泡溢出，然后打开活塞，挤压硅胶软管，排出玻璃砂芯滤板下方和活塞之间的气泡，使溶剂充满此部分空间，然后关闭活塞；

(3)、将溶胀后的聚苯乙烯凝胶和溶剂倒入烧杯中，充分搅拌直至聚苯乙烯凝胶均匀的悬浮在溶剂中，制得凝胶悬浮液，然后将凝胶悬浮液由色谱柱的顶端倒入于色谱柱中，使凝胶悬浮液自然沉降，当色谱柱底部的凝胶悬浮液沉积至1/5柱体积时，打开色谱柱下端活塞，并调节流速至2～3mL/min，然后继续倒入凝胶悬浮液至柱体积5/6处，并保持凝胶始终浸泡在溶剂中，待凝胶完全沉降均匀后，在凝胶层之上加入1/12柱体积的海沙，铺平，即制得所述凝胶色谱柱。

2.根据权利要求1所述的凝胶色谱柱，其特征在于：步骤(1)所述的溶剂中环己烷和乙酸乙酯的体积比为1:1。

3.根据权利要求1所述的凝胶色谱柱，其特征在于：步骤(2)所述的色谱柱的长径比为8～10:1。

4.一种基于权利要求1所述的凝胶色谱柱检测多溴联苯醚及其代谢物的方法，其特征在于包括以下步骤：(1)、将待测样品与硅藻土按照1:8～10的体积比混合，再用二氯甲烷与正己烷按照1:1的体积比混合后的溶液进行洗脱，收集并浓缩待测样品洗脱液，制得浓缩液A；

(2)、在浓缩液A中加入内标碳13标记内标PBDEs 28,47,99,100,154,153和183，浓度为100ng/mL，以及BDE17,BDE28,BDE47,BDE66,BDE71,BDE85,BDE99,BDE100,BDE138,BDE153,BDE154,BDE183和BDE190以及代谢物5-MeO-BDE47,6-MeO-BDE47,4′-MeO-BDE49,2′-MeO-BDE68,5′-MeO-BDE99,5′-MeO-BDE100,4′-MeO-BDE101和4′-MeO-BDE103的混合标准溶液，浓度为100ng/mL；将以上物质加入浓缩液中并混合均匀，再将浓缩液注入色谱柱内，直至浓缩液的液面与海砂面平齐；

(3)、采用1.2～1.4倍柱体积的溶剂进行洗脱，洗脱流速为1.00～1.50mL/min，弃去前50～60％柱体积的洗脱液，收集剩余部分的洗脱液于蒸发瓶中，后续经旋转蒸发与氮吹浓缩至0.9～1.1mL，制得浓缩液B，供GC-MS检测用；

(4)、将浓缩液B注入GC-MS中，采用Elite-5MS毛细管色谱柱，进样体积为2.0～3.0μL，不分流模式进样，以氦气作为载气，载气流速为0.8～1.2mL/min，进样口温度为270～280℃，衬管采用脱活衬管，传输线温度为315℃～325℃，离子源温度245℃～255℃，采用70ev的EI电离方式，扫描方式为SIM，柱温箱程序升温条件为：95℃～105℃保持0.8～1.2min→195℃～205℃，升温速度为18℃/min～22℃/min；195℃～205℃→275℃～285℃，升温速度为2.4℃/min～2.6℃/min；275℃～285℃→315℃～325℃，升温速度为4.5℃/min～5.5℃/min，315℃～325℃保持9～11min；

(5)、采用同位素稀释内标法定量，即以待测物浓度为横坐标，待测物峰面积与相应的同位素峰面积之比为纵坐标，得到工作曲线，从而计算中待测样品中BDE17,BDE28,BDE47,BDE66,BDE71,BDE85,BDE99,BDE100,BDE138,BDE153,BDE154,BDE183和BDE190以及代谢物5-MeO-BDE47,6-MeO-BDE47,4′-MeO-BDE49,2′-MeO-BDE68,5′-MeO-BDE99,5′-MeO-BDE100,4′-MeO-BDE101和4′-MeO-BDE103的含量。