[发明专利]富含两种必需氨基酸的功能蛋白饲料生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及动物饲料生产技术领域，尤其是涉及一种富含两种必需氨基酸的功能蛋白饲料生产方法。

背景技术

 我国养殖业发达，每年消耗的大量饲料蛋白质原料的主要来源为豆粕和鱼粉。虽然这两种产品的粗蛋白含量较高，但鱼粉存在质量不均一，资源日益短缺等问题，而饼粕类饲料成本虽较低，但属于植物蛋白，其中含有大量的抗营养因子，影响动物对饲料的消化和吸收。为解决这一问题，近年出现了利用乳酸菌，芽孢杆菌，酵母菌和光合细菌等混菌发酵生产饲料蛋白原料的技术。此类技术利用发酵饼粕等农副产品，达到消除抗营养因子，增加蛋白含量目的，如国家专利（公布号：CN102488084A）就公开了一种好氧混合菌发酵秸秆饼粕制备蛋白饲料方法；国家专利（公布号：CN101449739）也公布了一种微生态发酵蛋白饲料及其制备方法。但是，常见的发酵饲料生产技术通常难以解决蛋白饲料中氨基酸的平衡问题，特别是必需氨基酸（如精氨酸，赖氨酸，苏氨酸等）的含量和组成平衡问题。最新研究表明，补充含必需氨基酸的低蛋白日粮，可以降低饲养成本，减少养殖场环境污染，降低幼畜腹泻率。然而，目前饲料中使用的氨基酸几乎都是先通过生物发酵法生产纯品，再混合添加到浓缩料或全价料中，大幅度提高了饲养成本。

使用芽孢杆菌、酵母菌、乳酸菌等微生物可直接发酵豆粕等农副产品，虽然可以消除豆粕中的抗营养因子、提高消化率，如国家专利（公布号：CN102406134A）就提供了一种高消化率发酵豆粕的固态发酵方法，但这些方法生产的发酵蛋白饲料很难提高其中必需氨基酸的含量。

发明内容

本发明的目的在于提供一种利用豆粕、棉粕、菜籽粕和花生粕中的一种或两种以上混合发酵制得富含两种必需氨基酸的功能蛋白饲料生产方法。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的富含两种必需氨基酸的功能蛋白饲料生产方法包括下述步骤：

第一步，液体发酵

将编号为CICC 20906、CICC 20191、 CICC 20903、CICC 20887和CICC 20192五种谷氨酸棒杆菌中的任意两种按1:1比例混合先进行种子培养和液体发酵；将编号为CICC 1410的白地霉菌进行种子培养，然后接入到谷氨酸棒杆菌发酵液中混菌发酵，得到混菌发酵液备用；

将编号为CICC20022或CICC20038的植物乳杆菌单独发酵，发酵液备用；

将编号为CICC23413或CICC20443的纳豆芽孢杆菌单独发酵，发酵液备用；

第二步，制备发酵醪液

将第一步制得的发酵液按谷氨酸棒杆菌和白地霉混菌发酵液10~60份，植物乳杆菌发酵液0~30份或/和纳豆芽孢杆菌发酵液0~30份混合，用Ca(OH)₂调节pH值至中性，得到发酵醪液备用；

第三步，固态发酵

按重量比将100~150份豆粕、棉粕、菜籽粕和花生粕中的一种或两种以上物料与5~10份糖蜜混合，得到固态发酵原料；将第二步得到的发酵醪液按固态发酵原料重量的50~100%的比例与发酵原料混合，进行有氧固态发酵，发酵条件为：起始温度20~30℃，过程控制温度30℃~45℃，发酵时间为48~72h；

  第四步，烘干包装

  发酵结束，将发酵物料在60~70℃条件下烘干到含水量≤12%，粉碎后计量包装，即可得到富含两种必需氨基酸的高蛋白饲料。

所述第一步中谷氨酸棒杆菌与白地霉混菌发酵液的制备方法为：

将使用牛肉膏蛋白胨培养基活化后的任意两种谷氨酸棒杆菌种用无菌生理盐水制成悬浮菌液，接种到液体发酵种子培养基中培养，培养基组成：葡萄糖100~120g/L、(NH₄)₂SO₄ 20~30g/L、玉米浆10~20g/L、KH₂PO₄ 1~1.5g/L、MgSO₄·7H₂O 0.3~0.5 g/L、生物素5~8×10^-5 g/L、CaCO₃ 10~30 g/L；pH7.0，0.12 MPa下灭菌20 min；培养条件：罐压0.03~0.1 Mpa，搅拌转速 170~230 r/min，通风量1:0.25~0.5，培养温度30~32℃，发酵时间24~48 h；将白地霉菌用无菌生理盐水制成悬浮菌液，当谷氨酸棒杆菌发酵液的产酸率达到4.1%以上时，接入白地霉悬浮菌液，继续培养发酵10h即可。