[发明专利]一种淡水珍珠蚌噬菌体型溶菌酶重组蛋白的制备方法

权利要求书

1.一种淡水珍珠蚌噬菌体型溶菌酶重组蛋白的制备方法，包括以下步骤：

设计含有酶切位点引物；

利用设计的含有酶切位点引物将噬菌体型溶菌酶基因进行PCR扩增，并通过酶切、转化、筛选构建原核表达载体pET-30a(+)-LYZPh；

再将原核表达载体pET-30a(+)-LYZPh转化至大肠杆菌BL21(DE3)并用IPTG进行目的基因的诱导表达，获得含溶菌酶重组蛋白的菌液；

通过镍离子亲和柱层析对上述菌液进行纯化，用聚乙二醇 8000对重组蛋白进行浓缩后用15%SDS-PAGE电泳检测目的蛋白的纯化效果。

2.根据权利要求1所述的一种淡水珍珠蚌噬菌体型溶菌酶重组蛋白的制备方法，其特征是，所述的酶切位点引物包括上游引物： GTGTGAATTCATGGCTGCATCTTCAAACTCA和下游引物：CACACTCGAGTCAATCAGCCAAGTTTCTTATTCTCG，上游引物序列中GAATTC片段为EcoRI酶切位点；下游引物序列中CTCGAG片段为XhoI酶切位点。