[发明专利]一种复合微生物絮凝剂的制备方法及其使用方法

权利要求书

1.一种复合微生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤A、菌种的活化：

将聚磷菌接种于固体培养基上，在28-30℃环境下培养48-72h；

步骤B、三角瓶扩大培养：

首先，制备聚磷菌的液体培养基装入三角瓶中，将步骤A中固体培养基上长出单菌落接种进三角瓶中，将三角瓶置于摇床中，摇床转速设定为150r/min、温度设定为28-30℃，培养至三角瓶中菌体含量达到1.0×10⁸-6.0×10⁸个/mL；

步骤C、发酵罐混合扩大培养：

制备混合培养基加入发酵罐中，将步骤B中培养得到的菌种接入发酵罐中，在28-30℃环境下培养至菌体含量达到2.0×10⁸-3.0×10⁸个/mL；

步骤D、复合微生物的制备：

将步骤C中得到的菌种培养液干燥得到复合微生物；

步骤E、制备复合微生物絮凝剂：

将步骤D得到的复合微生物与氢氧化钙、聚丙烯酰胺和活性白土混合均匀得到复合微生物絮凝剂。

2.根据权利要求1所述的一种复合微生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，所述步骤A中，所述聚磷菌为沼泽红假单胞菌(Rhhodopseudomonas palustris)CGMCC No.12180、假单胞菌(Pseudomonas sp.)CGMCC No.17111和绛红色诺卡氏菌(Nocardia purpurea)CGMCC No.41182中一种或多种。

3.根据权利要求2所述的一种复合微生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，所述步骤A中，

沼泽红假单胞菌固体培养基的配制方法：将NH₄Cl 1g，K₂HPO₄0.5g，MgCl₂0.2g，NaCl 2g，酵母浸粉0.1g和琼脂粉15-20g加入900mL蒸馏水中，121℃灭菌30min，灭菌后加入NaHCO₃0.1g，Na₂S·9H₂O 0.1mL，加水补至1L，用H₃PO₄调pH至7.0制得；

假单胞菌固体培养基的配制方法：将蛋白胨10g，K₂HPO₄1.5g，MgSO₄·7H₂O 1.5g和琼脂粉15-20g加入1L蒸馏水中，121℃灭菌30min制得；

绛红色诺卡氏菌固体培养基的配制方法：将葡萄糖10g，酵母浸粉10g和琼脂粉15-20g加入1L蒸馏水中，121℃灭菌30min制得。

4.根据权利要求2所述的一种复合微生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，所述步骤B中，

沼泽红假单胞菌液体培养基的配制方法：将NH₄Cl 1g，K₂HPO₄0.2g，CH₃COONa 5g，MgSO₄·7H₂O 0.2g，NaCl 2g，生长因子1mL和微量元素溶液1mL加入1L蒸馏水中，121℃灭菌30min后加入NaHCO₃0.1g制得；

假单胞菌液体培养基的配制方法：将蛋白胨10g，K₂HPO₄1.5g和MgSO₄·7H₂O 1.5g加入1L蒸馏水中，121℃灭菌30min制得；

绛红色诺卡氏菌液体培养基的配制方法：将葡萄糖10g，酵母浸粉10g加入1L蒸馏水中，121℃灭菌30min制得。

5.根据权利要求2所述的一种复合微生物絮凝剂的制备方法，其特征在于，所述步骤C中，发酵罐中接种聚磷菌的体积为发酵罐中培养基体积的5-30％。