[发明专利]一种具有增强鉴别能力的常染色体STR基因座荧光标记复合扩增试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种具有增强鉴别能力的常染色体STR基因座荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于，所述试剂盒同时扩增27个STR基因座；包括下列24个常染色体STR基因座：D3S1358、TH01、D21S11、D18S51、Penta E、D12S391、D6S1043、D2S1338、D1S1656、D2S441、D5S818、D13S317、D7S820、D19S433、CSF1PO、Penta D、vWA、D8S1179、TPOX、FGA、D16S539、D22S1045、SE33和D10S1248，2个Y染色体基因座Y-indel、DYS391及一个性别决定位点Amel。

2.如权利要求1所述的一种具有增强鉴别能力的常染色体STR基因座荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于，所述27个STR基因座的相应扩增引物的对应关系为：

3.根据权利要求2所述的一种具有增强鉴别能力的常染色体STR基因座荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于：所述的各STR基因座采用位于该基因座核心重复区两侧的一对引物扩增，其中每对引物中有一条引物的5’端用荧光染料标记，其中蓝色荧光染料FAM、绿色荧光染料HEX、黄色荧光染料TAM、红色荧光染料ROX，紫色燃料Alex 594，内标选用橙色荧光Atto 633。

4.根据权利要求2所述的一种具有增强鉴别能力的常染色体STR基因座荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于，所述荧光染料标记的方法为：第一组FAM标记：D3S1358、TH01、D21S11、D18S51和Penta E，第二组HEX标记：Y-indel、DYS391、D12S391、D6S1043、D2S1338和D1S1656，第三组TAM标记：D5S818、D13S317、D7S820、D19S433、CSF1PO和Penta D，第四组ROX标记：D2S441、vWA、D8S1179、TPOX和FGA，第五组Alex 594标记：Amel、D16S539、D22S1045、SE33及D10S1248，内标选用橙色荧光标记，荧光标记物为Atto 633。

5.根据权利要求1-4任意一项所述的一种具有增强鉴别能力的常染色体STR基因座荧光标记复合扩增试剂盒，其特征在于，所述的试剂盒包括如下组分：无核酸水、PCR Master Mix、Primer Mix和人基因组阳性对照；

其中所述无核酸酶水是指无RNA酶和DNA酶的超纯水；

所述的PCR Master Mix包括了DMSO 10mM、Tris-buffer 125mM、氯化钾125mM、硫酸铵65mM、磷酸脱氧核苷酸7.5mM，BSA2.5mg/ml；

所述Primer Mix包括扩增27个基因座的所有引物、Taq酶2-4U/6.25μl、氯化镁7.5Mm；

所述Primer Mix中各引物浓度见下表所示：

6.根据权利要求1-5任意一项所述的一种具有增强鉴别能力的常染色体STR基因座荧光标记复合扩增试剂盒在性别鉴定、亲子鉴定或法医鉴定中的应用。