[发明专利]一种白及种子的液体快速繁殖方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种植物的快速繁殖方法，特别涉及一种白及种子的液体快速繁殖方法。

背景技术

高等植物的组培技术是指通过无菌操作分离植物体的一部分，接种到培养基上，在人工控制的条件下进行培养，使其生成完整的植株。组织培养是本世纪发展起来的一门新技术，由于科学技术的进步，外源激素的广泛应用，使得组织培养不仅从理论上为相关学科提供了可靠的实验依据，而且成为一种大规模、批量工厂化生产种苗的新方法。植物组织培养具有培养条件可以人为控制，生长周期短、繁殖率高、成本低廉，能够较好的保存母本性状，管理方便，利于工厂化生产和自动化控制等优点在生产上越来越得到广泛的应用。

白及为多年生草本植物，又名连及草、甘根、紫蕙，全世界白及属植物有九种，我国有4种，即华白及、黄花白及、小白及、白及。其中白及为《中国药典》（1995、2005年版）所收载，性温、味苦、甘、辛。具有补肺、止血、散风除湿、通窍止痛、收敛止血、消肿生肌等功效，主要用于治疗感冒头痛、鼻塞、鼻渊、牙痛、白带、肺伤咳血、衄血、金疮出血、痈疽肿毒、溃疡疼痛、手足皱裂等。未经人工选育的野生白及植株矮小，紫花白及高30cm，白及叶3-6片，长披针形，中部稍宽，先端尖。白及3月份萌发，花期4-5月，果期8-10月。12月倒苗。白及虽然结果，却不能依靠种子繁衍，成熟的白及种子呈橄榄形，黄色粉末状，细小，种皮为单层细胞组成，侧壁加厚，细胞器及原生质体消失，胚椭圆形，未分化，胚柄退化，无胚乳。自然状态下极少萌发。目前白及繁殖主要依靠块茎，长期的无性繁殖，不仅繁殖周期长，速度慢，而且需要的种源大，与药争夺原料。长期的无性繁殖容易引起种性退化，土地连年耕作，白及假鳞茎积累大量病毒，严重影响产量和品质，因此这种方式很难满足规模化种植的需求。

目前白及人工繁育研究工作进展缓慢，植物生长环节的奥秘往往超越绝大多数生产者的认识水平，白及家种只能以假鳞茎为种苗，必然面临种子苗稀缺的困境，大规模产业化种植依然遥不可及。

为此，有学者通过组织培养的方式，解决白及繁殖效率低和病毒感染等问题，一般是以成熟的种子为外植体，在有激素或者无激素的培养基上萌发，诱导形成愈伤，继代扩增或者诱导丛生芽增殖，成苗。一般白及组培可以包括五个步骤：

（1）外植体的选择与消毒。

（2）种子萌发。

（3）丛生芽诱导。

（4）成苗培养。

（5）炼苗和移栽。

虽然白及组培研究取得了一定的成绩，但是仍然存在以下问题：1，以白及假鳞茎、茎段为外植体，由于其含有大量内生菌和病毒，组培污染率高，成功率很低。2，以白及茎尖生长点和种子为外植体成功率虽然相对较高，但是从脱分化、增殖、分化、炼苗、移栽过程周期长，至少需要半年以上，期间需要转接数次，工作量大，成本高。而且技术含量高，对于从业人员的要求高，一般企业和药农种植户很难做到。所以，仍然没有从根本上解决白及种质资源问题，至今白及价格呈现上涨趋势。为此，寻求更好、更经济、更快捷的繁殖技术方法，扩大生产满足市场需求依然十分必要。

发明内容

本发明的目的在于解决白及繁殖效率低，白及组培操作繁琐，周期长的问题,提供一种白及种子的液体快速繁殖方法，可以将白及的种苗繁殖工厂化，在短时间内获得满足大规模生产所需要要的种苗，还有具有成本低、种苗生长整齐、炼苗驯化成活率高等特点。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：

一种白及种子的液体快速繁殖方法，步骤包括：（1）外植体的选择与消毒，（2）种子萌发及幼苗培养，（3）成苗培养，（4）炼苗和移栽；所述种子萌发及幼苗培养步骤具体为：将白及种子在液体培养基中培养，培养条件为：温度26±2℃，光照强度3000-3500Lx，光照时间为14-16小时/天，培养时间为45-60天。延长种子萌发的时间，由原先的2周延长到45-60天，在液体培养基上，直接培养形成长1.5-2cm，有少许根须的小苗。

作为优选，所述液体培养基配方为1/2MS，pH为5.8-6.4；液体培养基装于规格为650mL的培养瓶中，控制培养瓶中的液体量为250-300mL，每个培养瓶接种量为300-400颗白及种子。

作为优选，步骤（1）外植体的选择与消毒具体为：选用9月中旬至11月中旬，成熟未开裂的白及果荚，首先用0.3%-0.5%浓度的洗衣粉水溶液浸泡15-30分钟，然后在超净台内用75%乙醇消毒2-3分钟，再用0.1%升汞溶液消毒20-25分钟，装入无菌纸袋中，33±2℃烘干。此方法可以较好保存种子活力，方便取用。