[发明专利]pH梯度洗脱法同步分离甘草膏中三萜皂苷类及甘草黄酮类化合物的方法

说明书

技术领域

本发明涉及pH梯度洗脱法同步分离甘草膏中三萜皂苷类及甘草黄酮类等化合物的方法。

背景技术

甘草为豆科植物甘草(Glycyrrhiza uralensis Fisch)、胀果甘草G.inflata Bat、光果甘草G.glabra L的干燥根及根茎。主产于内蒙古、甘肃、新疆、宁夏及东北等地。春、秋两季采挖，以秋采者为佳。甘草味甘、性平，归心、肺、脾、胃经。具有补脾益气、祛痰止咳、缓急止痛、清热解毒、调和诸药的功效。

据现有资料报道，国内外已从甘草中分离得到100多种黄酮类化合物，60多种三萜类化合物、以及多糖、香豆素类、l8种氮基酸、多种生物碱，雌性激素和多种有机酸等。其中三萜类化合物、黄酮类化合物和多糖类是主要成分。

甘草中药成分的提取和分离纯化方法很多，工业应用较多的提取方法主要有水提法、醇提法、氨水提取法等，分离纯化方法主要有液-液萃取法、聚酰胺法、大孔吸附树脂法等。

专利CN200610018275.3采用有机溶剂萃取，醇沉，酸化等步骤得到甘草黄酮粗品、甘草多糖粗品和甘草酸粗品。专利CN03105372.6首先采用微波辅助提取法将甘草酸从甘草中快速高效地提取出来，然后采用有机溶剂萃取的方法得到精制甘草酸。专利CN201110262440.0采用聚酰胺柱层析法制备了高纯度的甘草酸。CN201110075470.0、CN201110318687.X、CN200510038035.5等专利采用大孔吸附树脂法对中药有效成分进行富集，采用不同浓度的乙醇作为洗脱剂进行分离纯化。采用大孔树脂法分离纯化甘草中药成分的文献也多有报道，也是采用不同浓度的乙醇进行洗脱，获取目标成分。该法的优点在于操作简单、易于大批量生产。缺点是即使回收溶剂，消耗的乙醇依旧较多，能耗较大，需要控制成本。

已知甘草中主要成分除多糖外，三萜皂苷类和黄酮类均为酸性化合物，但二者酸性强弱不同，存在酸性梯度，若能充分利用二者的酸性差异进行分离，不仅可以提高目标成分的收率，还可以大大节约生产的成本。

另外三萜皂苷类成分甘草酸是一种表面活性物质，易溶于热水，加热条件下柱层析对这类成分的分离有利。而常见的单层玻璃层析柱由层析玻管、出料管和出料控制阀组成，材质为普通玻璃，仅能在常温下进行分离操作。中国专利CN200910089340.5公开的一种恒压密闭上行层析柱装置，中国专利CN200920316761.2公开的一种自动加液层析柱，CN201420166784.0公开的一种包含储液器和柱体的玻璃层析柱以及福州大学的李玉林根据高效液相色谱的基本原理研制出的TLC Mesh层析柱与常见的玻璃层析柱一样，装置也仅能实现常温分离操作。为满足化学、化工及制药领域中如甘草酸的温敏性特殊成分非常温柱分离的需要，有必要设计一种简便易行、热膨胀系数小强度高能耐受较大温差，并能有效控制柱温的层析柱装置。

发明内容

本发明的目的是为了改变传统大孔树脂乙醇洗脱工艺消耗乙醇较多，回收溶剂能耗较大的现状，以甘草提取多糖后的浸膏为原料，利用其中三萜皂苷类成分和甘草黄酮类成分的酸性差异，优选碱性溶液作为洗脱溶剂进行梯度分离，提高目标成分的收率，节约生产成本；同时根据甘草酸易溶于热水的特性，以及化学、化工及制药过程中加热有利于传质的原理，设计开发一种可控制柱温的高硼硅酸盐玻璃夹层层析柱应用于洗脱过程，可在加热条件下进行洗脱，提高甘草酸的收率，实现甘草资源的充分有效利用，也为化学、化工和制药领域中温敏性特殊成分的非常温柱分离提供一种简便易行的实验装置。

本发明的技术方案如下：

本发明的一种可控制柱温的高硼硅酸盐玻璃层析柱，在层析柱本体的上端设置有进料口、内部设置有砂芯，下端设置有出料管，出料管上设置有出料控制阀，出料管的直径小于层析柱本体的直径，在层析柱本体的外周设置有夹套层，层析柱本体的外周全部被夹套层所包围，夹套层与所述层析柱本体之间形成空腔，夹套层上设置有载体的进出口。

所述层析柱本体厚度b1≧3mm。

所述夹套层厚度b2≧3mm。

所述层析柱夹套层内径和层析柱本体外径之差≧10mm。

所述出料控制阀材质为聚四氟乙烯或高硼硅酸盐玻璃。