[发明专利]一种白芨组织培养基及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于植物组织培养领域，具体涉及一种白芨组织培养基及其制备方法。

背景技术

白芨，又名白及，为兰科白及属多年生草本植物。以干燥块茎药用，具有收敛止血，消肿生肌之功效。临床上常用于治疗肺结核咳血、胃溃疡吐血、便血以及外伤出血等疾病。白芨的块茎含有丰富的白芨多糖，其主要成分是葡萄甘露聚糖，目前这种物质被广泛地应用于食品工业、医学卫生材料和日化工业化中。

白芨种子微如尘埃，在自然环境中极难萌发，野生资源随着需求量的增大急剧减少，濒临灭绝。目前，白芨已列入《中华人民共和国野生植物保护条例》。

近年来，由于白芨价格的飞涨，野生资源不断减少，白芨的组织培养技术成为了当前研究的热点。白芨组织培养的相关技术已经成熟，但由于培养周期较长，培育的原球茎较小，影响后期炼苗以及栽培的成活率。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种白芨组织培养基，以缩短白芨组织培养周期，保证种苗原球茎大且均一。

本发明还要解决的技术问题是提供上述白芨组织培养基的制备方法。

为解决上述问题，本发明采用的技术方案如下：

一种白芨组织培养基，它包括种子萌发培养基和壮苗培养基；

其中，

种子萌发培养基的配方为1/2MS大量元素+0.5～1.0mg/L6-苄胺基嘌呤+0.2～1.0mg/L萘乙酸+50～100g/L马铃薯+25g/L蔗糖+6.0g/L琼脂，溶剂为水，pH为5.8～6.0；

壮苗培养基为的配方为N6大量元素+MS有机物+MS微量元素+0.1～1.0mg/L萘乙酸+50～100g/L香蕉泥+25g/L蔗糖+6.0g/L琼脂，溶剂为水，pH为5.8～6.0。

其中，所述的MS大量元素的配方为硝酸铵1600～1700mg/L+硝酸钾1800～2000mg/L+二水合氯化钙430～440mg/L+七水合硫酸镁350～400mg/L+磷酸二氢钾170～200mg/L，溶剂为水。

其中，所述的N6大量元素的配方为硝酸钾2500～3000mg/L+硫酸铵450～500mg/L+二水合氯化钙150～200mg/L+七水合硫酸镁150～200mg/L+磷酸二氢钾400～500mg/L，溶剂为水。

其中，所述的MS微量元素的配方为四水合硫酸锰22.3mg/L+七水合硫酸锌8.6mg/L+六水合氯化钴0.025mg/L+五水合硫酸铜0.025mg/L+碘化钾0.83mg/L+硼酸6.2mg/L+七水合硫酸亚铁27.8mg/L+乙二胺四乙酸二钠37.3mg/L，溶剂为水。

其中，所述的MS有机物的配方为烟酸0.1～0.5mg/L+盐酸吡哆醇0.1～0.5mg/L+盐酸硫胺素0.1～1.0mg/L+甘氨酸2～4mg/L+肌醇50～100mg/L，溶剂为水。

上述的白芨组织培养基的制备方法，它包括如下步骤：

(1)按配方量配置MS大量元素、MS微量元素、MS有机物和N6大量元素备用；

(2)将配方量的马铃薯和香蕉切成1cm*1cm*1cm的小块，分别加水搅拌后，得到马铃薯泥和香蕉泥；

(3)将步骤(1)和步骤(2)得到的MS大量元素、MS微量元素、MS有机物、N6大量元素、马铃薯泥和香蕉泥按配方量配置种子萌发培养液和壮苗培养液；

(4)将步骤(3)得到的种子萌发培养液和壮苗培养液分别调节pH至5.8～6.0，分装后于121℃高压灭菌20～30min；

(5)将步骤(4)所得的种子萌发培养液和壮苗培养液冷凝后即得本发明中的种子萌发培养基和壮苗培养基。

步骤(4)中，调节pH所用的试剂为1mol/L氢氧化钾水溶液和1mol/L盐酸水溶液。

有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下优势：

1、利用本发明配制的培养基，假鳞茎形成率能达到95％，组培苗成苗率超过98％，且原球茎大，移栽炼苗成活率高。

2、本发明采用N6和MS相结合的方式壮苗，营养成分丰富，适合白芨苗原球茎的增殖和生根，大大缩短了白芨培养的周期，降低了生产成本。

附图说明

图1为实施例2中白芨种子萌发示意图。

图2为实施例2中白芨壮苗培养示意图。

具体实施方式