[发明专利]D-二聚体胶体金法检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及生物检测领域，特别是涉及一种D-二聚体胶体金法检测试剂盒及其制备方法和用途。

背景技术

D-二聚体是交联纤维特异性降解产物，也是继发性纤溶特有代谢产物。D-二聚体是在各种病理或生理状态下，凝血系统激活导致凝血活酶将纤维蛋白原转化成纤维蛋白体，并在活化因子XIII的作用下形成交联纤维蛋白。D-二聚体是交联纤维蛋白在纤溶酶讲解过程中所释放碎片进一步降级产生的含有γ链的片段。受到病理因素影响，机体凝血及纤溶动态平衡遭到破坏，凝血倾向不断增加，从而导致纤维蛋白降解产物增加。因此，D-二聚体含量升高，表明机体内存在纤维蛋白血栓形成和纤溶发生，临床上也将D-二聚体含量的变化作为机体高凝状态与纤溶亢进状态的分子标志物。

D-二聚体的检测是临床对继发性纤溶灵敏度较高、特异性强的检验项目，是目前判断机体高凝状态和鉴别原发性与继发性纤溶、观察溶栓治疗效果等方面有重要临床价值的指标。D-二聚体的检测有重大的临床应用价值：可用于弥漫性血管内凝血(DIC)的早期诊断，深静脉血栓(DVT)及肺栓塞的筛查，急性脑梗死的早期诊断、治疗和愈后观察，肝病的治疗和诊断及对恶性肿瘤的疗效和愈后观察等。

因此，对D-二聚体的快速、全面、准确、特异检测显得尤为重要。

发明内容

鉴于以上所述现有技术的缺点，本发明的目的在于提供一种D-二聚体胶体金法检测试剂盒及其制备方法和用途，用于解决现有技术中的问题。

为实现上述目的及其他相关目的，本发明采用以下技术方案：

本发明的第一方面，提供一种D-二聚体胶体金法检测试剂盒，包括试纸卡，所述试纸卡包括底板、及位于底板表面的从加样端开始依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸水垫，所述金标垫上包含胶体金标记的抗D-二聚体单克隆抗体-1，所述硝酸纤维素膜上包被有检测线和质控线。

优选的，所述底板为PVC底板。

优选的，所述硝酸纤维素膜上，检测线位于离加样端较近一侧，质控线位于离加样端较远一侧。

优选的，所述检测线上包被有抗D-二聚体单克隆抗体-2。

优选的，所述质控线上包被有羊抗鼠免疫球蛋白IgG。

所述抗D-二聚体单克隆抗体-1和抗D-二聚体单克隆抗体-2可以是相同的单克隆抗体，也可以是不同的单克隆抗体。

优选的，所述抗D-二聚体单克隆抗体-1为Anti-D-Dimer抗体[DD1]，所述抗D-二聚体单克隆抗体-2为Anti-D-Dimer抗体[DD1]，或所述抗D-二聚体单克隆抗体-1为Anti-D-Dimer抗体[DD1]，所述抗D-二聚体单克隆抗体-2为Anti-D-Dimer抗体[DD2]。

优选的，所述样品垫采用缓冲液处理，所述缓冲液选自PBS缓冲液、Tris-HCl缓冲液、甘氨酸缓冲液、硼酸盐缓冲液和柠檬酸-磷酸盐缓冲液中的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为50-100mM。

优选的，本发明所述的金标垫还经过预处理，预处理时所使用的预处理缓冲液选自甘氨酸缓冲液、Tris-HCl缓冲液、硼酸盐缓冲液的一种或多种的组合，缓冲液的浓度为10-40mM。

更优选的，为了使得试剂盒具有更佳的灵敏度和显色效果，所述缓冲液还包括NaCl和冠醚，所述冠醚选自二环已基-18-冠-6、15-冠醚-5、18-冠醚-6中的一种或多种的组合，NaCl在缓冲液中的浓度为0.1-20mg/ml，冠醚在缓冲液中的浓度为0.1-20mg/ml。

更优选的，NaCl在缓冲液中的浓度为0.25-0.5mg/ml，冠醚在缓冲液中的浓度为4-8mg/ml。

所述预处理缓冲液的溶剂为水。

所述预处理的具体步骤为：将金标垫在预处理液中浸泡1.5～2h，取出放于36～38℃烘干。

所述预处理缓冲液可使用本领域各种常用的pH调节剂进行pH值的调节。

优选的，所述试剂盒还包括卡壳，所述卡壳包括背卡和上盖，所述背卡设有试纸卡卡槽，所述试纸卡嵌于所述试纸卡卡槽内，所述上盖设有测试窗和加样孔，所述测试窗的位置与所述检测线和质控线的位置相配合，所述加样孔的位置与所述样品垫的位置相配合。

更优选的，所述卡壳为塑料卡壳。

优选的，所述检测试剂盒用于检测样品中的D-二聚体，所述样品选自人全血、血清或血浆中的一种或多种的组合。

本发明第二方面提供所述D-二聚体胶体金法检测试剂盒的制备方法，包括如下步骤：