[发明专利]一种提高人间充质干细胞功能的细胞处理方法

说明书

本发明涉及一种提高人间充质干细胞功能的细胞处理方法，其通过抑制CD26来增强间充质干细胞的趋化能力。

本发明研究得到以下课题资助：国家973计划基础重点研究干细胞项目(2012CB966504)；国家自然科学基金委面上项目(81170459)；国家863计划干细胞应用项目(2011AA020118)；天津市应用基础及前沿技术研究计划(11JCYBJC27400)。

发明领域

本发明涉及间充质干细胞领域，尤其是间充质干细胞的趋化标记物及其功能调节。

背景技术

CD26

CD26是高度保守的II型糖蛋白，目前已在20多个物种中发现。其膜结合形式属于脯氨酰寡肽酶家族。相比于该家族其它成员包含一个7叶螺旋桨结构域而言，CD26具有独特的8叶螺旋桨结构域(参见H.Hiramatsu等,Biochemical and Biophysical ResearchCommunications,302：849-854,2003)。CD26的编码基因可参见NCIB ID 1803。

CD26又名二肽基肽酶IV(Dipeptidyl peptidase IV,DPPIV)，具有丝氨酸蛋白酶的酶切活性，其单体所包含的766个氨基酸，可划分为5个区域：C端催化结构域(522-766)、半胱氨酸富含区(324-551)、高度糖基化区(29-323)、跨膜区(7-28)、胞内区(1-6)。目前已经发现DPPIV的多种底物，比如基质细胞衍生因子-1α(SDF-1α)和G-CSF。

CD26还被称为ADA结合蛋白，因为其能结合腺苷酸脱氨酶(ADA)，作为T细胞共刺激分子发挥作用。

间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)

间充质干细胞因能分化成间质组织而得名，是一类具有自我更新和多向分化能力的成体干细胞。特定条件下，间充质干细胞也可能实现跨胚层的组 织分化，其多向分化能力使得其有别于造血干细胞的单向分化。在体外特定的诱导条件下，可分化为脂肪、软骨、骨、肌肉、肌腱、神经、肝、心肌、胰岛β细胞和内皮等多种组织细胞，连续传代培养和冷冻保存后仍具有多向分化潜能。不论是自体还是同种异源的间充质干细胞，一般都不会引起受体的免疫反应。

间充质干细胞最早在骨髓中发现，随后还发现具有相同功能特征的间充质干细胞广泛存在于人体发生、发育过程的许多种组织中。2006年国际细胞治疗协会(ISCT，theInternational Society for Cellular Therapy)确定的间充质干细胞鉴定标准是：

-在塑料培养皿内贴壁生长，在血清培养基中高度增殖；

-表达间充质相关抗原CD105，CD73和CD90；

-不表达造血细胞和内皮细胞相关抗原CD45、CD34、CD14、CD11b、CD79a和CD19b；

-体外分化成骨细胞、脂肪细胞和软骨细胞。

目前已能从骨髓、脂肪、滑膜、骨骼、肌肉、肺、肝、胰腺以及羊水、脐带血、胎盘等多种组织中分离和制得间充质干细胞。

间充质干细胞能定向迁移到肿瘤细胞、损伤组织和细胞，因此，一直是肿瘤治疗、以及骨组织、心肌、脑组织的损伤修复等领域的热点。间充质干细胞也是造血微环境的原始细胞，在移植造血领域具有很好的应用前景。