[发明专利]一种异型性组织细胞干化学分析试剂膜及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种异型性组织细胞干化学分析试剂膜及其制备方法。

背景技术

干化学分析技术是指将液体检测样品直接加到干燥试剂条上，以被测样品的水分作为溶剂引起特定的化学反应，从而进行化学分析的方法。它采用反射光度法或差示电极法作为测量手段，主要具备以下特点：准确度高、速度快，一般在1～3min 内即可做出检验结果；操作简便，不需要日常校正；无须贮备任何其它试剂或配制任何溶液；它不仅可用于定性检查，目前还发展成为了半定量和定量的分析方法，已成为临床检验中一类重要的方法。目前市场上已经存在多种检测如尿蛋白、尿糖、隐血、胆红素、尿胆素原、酮体、比重、亚硝酸盐，细菌尿等的试剂带。但用于检测异型性组织细胞的干化学分析试剂膜尚未发现。

肿瘤组织无论在细胞形态和组织结构上，都与其发源的正常组织有不同程度的差异，这种差异称为异型性（atypia）。肿瘤组织异型性的大小反映了肿瘤组织的成熟程度（即分化程度，在此指肿瘤的实质细胞与其来源的正常细胞和组织在形态和功能上的相似程度）。异型性小者，说明它和正常组织相似，肿瘤组织成熟程度高（分化程度高）；异型性大者，表示瘤组织成熟程度低（分化程度低）。区别这种异型性的大小是诊断肿瘤，确定其良、恶性的主要组织学依据。恶性肿瘤常具有明显的异型性。肿瘤组织细胞原血红素（The protoheme of tumor cells，TCPH）是在组织细胞异型性变过程中产生一种因果性生物标志因子，是分析检测组织细胞异型性变的一种新方法。TCPH具有氧化损伤作用，它干扰细胞的微环境，催生多种自由基，引起细胞膜脂质、脂蛋白、细胞骨架、DNA等的氧化损伤，使细胞周期中的DNA损伤检查点等失去阻滞作用，引起染色体端粒附近DNA序列丢失以及染色体的重排和基因扩增，表现为组织细胞的异型性变化。TCPH析出量与细胞异型性改变程度呈正相关。所以，分析TCPH的有无及其含量，就可以了解组织细胞异型性改变的有无及其程度。由于肿瘤性炎症的炎性渗出，TCPH与肿瘤性炎性渗液一道被排出，肿瘤组织的炎性渗液可以作为直接生物学介质来检测肿瘤组织细胞原血红素的存在，进而分析组织细胞有否异型性变。

目前，已经研发出用于检测组织细胞异型性变化的液体试剂。但是，液体试剂一般稳定性较差，不易储藏，且使用不方便，不适合于临床快速分析检测应用。本专利旨在提供一种利用干化学法检测组织渗液中可能含有的肿瘤组织细胞原血红素，进而分析组织细胞异型性变化的专用试剂膜。

发明内容

本发明的目的在于提供一种异型性组织细胞干化学分析试剂膜，该试剂膜可以置入塑料试剂检测卡内单独使用，或与便携式读数仪配合使用，用于检测肿瘤组织细胞原血红素，进而分析组织细胞有否异型性变化及其程度。其具有结构简单、使用方便、快速、稳定性好的特点。

本发明还提供了该种异型性组织细胞干化学分析试剂膜的制备方法。该制备方法简单，制备的产品稳定性好，在低温、干燥环境下可保存使用3年。

本发明采用以下技术方案：

一种异型性组织细胞干化学分析试剂膜，其特征在于，它是将异型性组织细胞分析试剂溶液预置在空白试剂膜上分两次干燥制成；所述异型性组织细胞分析试剂溶液是由供氢体、过氧化物、络合剂、稳定剂、增敏剂、调色剂、有机助溶剂和缓冲液组成；

所述供氢体为3-5g/L的3，3’，5，5’-四甲基联苯胺；

所述过氧化物为4-8ml/L过氧化羟基异丙苯；

所述络合剂为0.92-1.05g/L乙二胺四乙酸二钠；

所述稳定剂为50-75g/L聚乙烯吡咯烷酮K30；

所述增敏剂为5-10ml/L 6-甲氧基喹啉；

所述调色剂为0.4-0.55g/L乙基橙；

所述有机助溶剂为1-2g/L十二烷基硫酸钠和无水乙醇；

所述缓冲液为0.5-2mol/L pH 3.2-6.8的磷酸盐缓冲液；

所述空白试剂膜为31ET滤纸。

优选的，所述异型性组织细胞分析试剂溶液由4g/L的3，3’，5，5’-四甲基联苯胺、5ml/L过氧化羟基异丙苯、0.99g/L乙二胺四乙酸二钠、55g/L聚乙烯吡咯烷酮K30、6ml/L 6-甲氧基喹啉、0.49g/L乙基橙、1.5g/L十二烷基硫酸钠、无水乙醇和1.75mol/L pH 5.5的磷酸盐缓冲液组成。

所述异型性组织细胞干化学分析试剂膜厚度为0.5mm，流速为180mm/30min。

所述的异型性组织细胞干化学分析试剂膜的制备方法，其特征在于，它包括以下步骤：