[发明专利]一种青蒿素及其衍生物抗肿瘤活性的体外筛选方法

权利要求书

1.一种青蒿素及其衍生物抗肿瘤活性的体外筛选方法，其特征在于，采用紫外-可见吸收光谱或荧光光谱分析青蒿素或其衍生物与转铁蛋白的相互作用，计算青蒿素或其衍生物与转铁蛋白的结合常数K_b，比较青蒿素或其衍生物与转铁蛋白的结合常数K_b或根据结合常数K_b进行排序，推断青蒿素或其衍生物抗肿瘤活性的强弱顺序，再采用抗肿瘤活性实验验证上述筛选结果。

2.根据权利要求1所述的青蒿素及其衍生物抗肿瘤活性的体外筛选方法，其特征在于，所述的方法包括以下步骤：

1)浓度恒定的转铁蛋白溶液中，逐渐增大溶液中青蒿素或其衍生物的浓度，扫描其紫外-可见光谱，由下列方程求出结合常数k_b

A₀/A-A₀＝ε_Tf/(ε_ART-Tf-ε_Tf)(1+1/k_b[ARTS])

式中：A₀和A分别表示青蒿素或其衍生物不存在和存在时转铁蛋白溶液的吸光度；[ARTS]为青蒿素或其衍生物的浓度；ε_Tf和ε_ART-Tf分别表示转铁蛋白和青蒿素或其衍生物-转铁蛋白复合物的吸收系数；

或者

浓度恒定的转铁蛋白溶液中，逐渐增大溶液中青蒿素或其衍生物的浓度，以280nm的激发波长扫描其荧光发射光谱；由下列方程计算结合常数K_b和结合位点数n

log[(F₀-F)/F]＝log K_b+n log[Q]

式中：F₀和F分别表示猝灭剂不存在和存在时转铁蛋白溶液的荧光强度；[Q]为青蒿素或其衍生物的浓度；

2)比较青蒿素或其衍生物与转铁蛋白的结合常数K_b或根据结合常数K_b进行排序，推断青蒿素或其衍生物抗肿瘤活性的强弱顺序；

3)采用抗肿瘤活性实验验证上述筛选结果。

3.根据权利要求1或2所述的青蒿素及其衍生物抗肿瘤活性的体外筛选方法，其特征在于，所述的青蒿素或其衍生物为青蒿素、双氢青蒿素、9-OH青蒿素、青蒿素醚类衍生物、酯类衍生物和杂原子取代双氢青蒿素羟基中氧的衍生物。

4.根据权利要求3所述的青蒿素及其衍生物抗肿瘤活性的体外筛选方法，其特征在于，所述的青蒿素醚类衍生物为蒿甲醚或篙乙醚，酯类衍生物为青蒿琥酯、青蒿素碳酸脂或青蒿素羧酸酯，杂原子取代双氢青蒿素羟基中氧的衍生物为卤素、氮或硫杂原子取代的双氢青蒿素衍生物。

5.根据权利要求2所述的青蒿素及其衍生物抗肿瘤活性的体外筛选方法，其特征在于，所述的方法中，转铁蛋白浓度范围为1.0×10^-6～1×10^-4mol/L；青蒿素或其衍生物浓度范围为1.0×10^-6～1×10^-3mol/L。