[发明专利]一种转运增菌培养基在审
申请号: | 201510298122.8 | 申请日: | 2015-06-04 |
公开(公告)号: | CN104846056A | 公开(公告)日: | 2015-08-19 |
发明(设计)人: | 李本传;宋立娜 | 申请(专利权)人: | 李本传 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04;C12R1/01 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 264200 山东省威*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 转运 培养基 | ||
技术领域
本发明涉及医学检验领域,具体涉及一种转运增菌培养基。
背景技术
奴卡菌病(Norcardosis)是由奴卡氏菌属细菌引起的一种人兽共患的慢性病,特征为组织化脓、坏死或形成脓肿。本病广泛分布于世界各地,以肺奴卡菌病作为常见,奴卡菌通过呼吸道引起人的原发性、化脓性肺部感染,可出现肺结核的症状。肺部病灶可转移到皮下组织,形成脓肿、溃疡和多发性瘘管,也可扩散到其他器官。临床症状上与肺结核、肺曲菌病、肺韦格氏肉芽肿相似,很容易误诊。
该病的临床诊断多依靠细菌培养,具体方法为:用普通血琼脂培养板(BAP)培养3天后有可见菌落,7~10天后菌落凸起,气生菌丝形成后,表面呈绒毛状。现有培养方式的存在以下问题:①由于奴卡氏菌属于苛养菌,即对生长环境、营养要求较苛刻的细菌,在普通环境中不能或难以生长,因此可靠诊断需要7天才能进行完成,经常延误了临床对奴卡菌病的准确诊断和及时采取有效的治疗措施,而造成奴卡菌病的病死率增高;②在标本采集和运送过程中,由于杂菌生长,奴卡菌受抑制,而导致奴卡菌分离培养阳性率偏低的对整个奴卡菌病的诊断影响巨大。因此,确保转运过程中充分增菌和防止杂菌污染很重要。
发明内容
本发明的技术任务是针对以上现有技术的不足,提供一种能够确保奴卡菌阳性检出率的足分支菌病诊断用培养基。
本发明解决其技术问题的技术方案是:一种转运增菌培养基,其特征在,每升中含有:牛肝粉10.0g;麦芽浸粉5.0g;酵母浸出粉5.0g;氯化钠5.0g;琼脂15.0g;枸橼酸铁铵0.3g;乳酸钙0.03g;D-环丝氨酸0.03g;毛子草酮0.003g;维生素K1 0.01g;络蛋白磷酸肽0.1g;无菌脱纤维绵羊血80ml;;蒸馏水加至1000ml。
上述培养基的制备方法为:称取牛肝粉;麦芽浸粉;酵母浸出粉;氯化钠;琼脂;枸橼酸铁铵;乳酸钙;毛子草酮混匀,蒸馏水溶解,210℃,灭菌15min,冷却到45℃,加入灭菌D-环丝氨酸;灭菌维生素k1;灭菌络蛋白磷酸肽;无菌脱纤维绵羊血混匀,灭菌蒸馏水定容到1000ml后分装。
其中:所述的牛肝粉、麦芽浸粉提供碳源、氮源,酵母浸出粉富含蛋白质、氨基酸、多肽、核苷酸、维生素、生长因子、微量元素等营养成分,为微生物提供均衡营养,这些物质对促进奴卡菌的繁殖和生长都是很重要的因素;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂为培养基的凝固剂;枸橼酸铁铵为营养剂,为奴卡菌繁殖生长提供必需的铁元素,且该浓度下,枸橼酸铁铵还具有缓冲剂作用;乳酸钙除了做营养增强剂外,还可以抑制革兰氏阳性球菌生长,;D-环丝氨酸提供营养的同时,该浓度下,还抑制革兰氏阴性菌的生长;毛子草酮(2-Ethoxymethylene-3,5-dihydroxy-y-pyrone),实验室研究表明毛子草酮可以抑制葡萄球菌、链球菌、变形杆菌、肠炎杆菌、多种真菌等杂菌的生长,但该浓度下由于对奴卡氏菌属无抗菌抑菌作用,因此提高了奴卡菌的分离率。通过实验将同一奴卡菌接种到2个BAP培养基上,其中一个BAP培养基添加0.1%灭菌维生素k1于37℃下培养,48小时后观察菌株,发现添加维生素k1的BAP培养基有小的奴卡菌菌落,没有添加维生素k1的BAP培养基未发现奴卡菌菌落,维生素k1促进细胞生长、分化,是奴卡菌的生长促进因子,有助于缩短培养时间;无菌脱纤维绵羊血提供能量环境;酪蛋白磷酸肽为激活剂,可以促进奴卡菌对铁元素、钙元素的摄取;天冬酰胺为营养强化剂,促进奴卡菌对氨基酸的摄取;生地黄为玄参科植物生地黄的新鲜或干燥块根,现代医学研究表明,生地黄根茎中含有20多种苷类;8种糖类;20余种氨基酸和20余种无机元素,生地黄水提液是良好的营养强化剂,并且有抑制金黄色葡萄球菌生长的作用。
本发明与现有技术相比较,具有检出可靠、奴卡菌分离率高的特点。
具体实施方式
以下结合实际情况,对本发明的具体实施方式作详细说明。
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