[发明专利]基于Ms1基因构建的介导玉米雄性生育力的多控不育载体及其应用

权利要求书

1.一种介导玉米雄性生育力的多控不育构建体，其特征在于，包含四种类型基因表达盒：第一种表达盒，为雄性不育玉米育性恢复基因的表达盒；第二种表达盒，为抑制玉米雄配子体的形成或功能的表达盒；第三种表达盒，为标记玉米种皮颜色的表达盒；第四种表达盒，为除草剂抗性基因表达盒。

2.根据权利要求1所述的雄性不育玉米育性恢复基因的表达盒，其特征在于：雄性不育玉米育性恢复基因的表达盒由启动子、雄性不育玉米育性恢复基因和终止子可操作地相连。

3.根据权利要求2所述的启动子选自玉米Ubiquitin基因、5126或Ms1基因的的启动子。

4.根据权利要求2所述的雄性不育玉米育性恢复基因为Ms1基因，其对于玉米的雄性生育力是关键的。

5.根据权利要求2所述的终止子选自农杆菌章鱼碱合酶(Ocs)基因的终止子。

6.根据权利要求1所述的构建体，可以包含1个或2个抑制玉米雄配子体的形成或功能的表达盒。

7.根据权利要求1所述的抑制玉米雄配子体的形成或功能的表达盒，其特征在于：抑制玉米雄配子体的形成或功能的表达盒由启动子、抑制玉米雄配子体的形成或功能的基因和终止子可操作地相连。

8.根据权利要求7所述的启动子可以为聚半乳糖醛酸酶47（PG47）基因的调控序列、Zm13基因的调控序列。

9.根据权利要求7所述的抑制玉米雄配子体的形成或功能的基因可以为淀粉酶基因、DAM甲基化酶基因或细胞毒素基因。

10.根据权利要求7所述的终止子是玉米In2-1基因的终止子或马铃薯蛋白酶抑制剂Ⅱ（PinⅡ）的终止子。

11.根据权利要求1所述的标记玉米种皮颜色的表达盒，其特征在于：标记玉米种皮颜色的表达盒由启动子、玉米种皮颜色标记基因和终止子可操作地相连。

12.根据权利要求11所述的启动子是玉米种皮特异表达的启动子。

13.根据权利要求11所述的玉米种皮颜色标记基因，其特征在于：玉米种皮颜色标记基因可以为但不限于红色荧光基因、绿色荧光基因。

14.根据权利要求11所述的终止子是胭脂碱合成酶基因(Nos)、章鱼碱合成酶基因(Ocs)的终止子 。

15.根据权利要求1所述的除草剂抗性基因的表达盒，其特征在于：除草剂抗性基因的表达盒由启动子、除草剂抗性基因和终止子可操作地相连。

16.根据权利要求15所述的启动子为花椰菜花叶病毒(CaMV)的35S 启动子。

17.根据权利要求15所述的除草剂抗性基因可以为但不限于EPSPS 基因、PAT 基因或BAR 基因。

18.根据权利要求15所述的终止子是来自花椰菜花叶病毒的35S polyA终止子。

19.一种包含权利要求1 所述构建体的重组载体。

20.一种包含权利要求1 所述构建体的植物细胞，所述植物为玉米。

21.一种方法，用于保持玉米雄性不育植株的纯合隐性状态，所述方法包括：

(a) 提供第一植株，其包含Ms1 基因的纯合隐性等位基因，并且其是雄性不育的；(b) 创制第二植株，所述第二植株是向上述第一植株中引入权利要求1所述构建体，且所述构建体只存在于同源染色体的其中一条染色体上，即所述构建体为半合子状态；所述第二植株包含Ms1 基因的纯合隐性等位基因；(c) 用所述第二植株的雄性配子给所述第一植株受精，以保持并产生所述第一植株纯合隐性状态的后代。

22.一种方法，用于繁殖含有所述构建体的玉米多控不育保持系种子和不含任何转基因元件的不育系种子；所述方法包括：(a) 通过权利要求21所述的第二植株自花受精；(b) 产生50%的含有所述构建体的种子；(c) 产生50%的正常不育系种子。