[发明专利]人干细胞生长因子注射液及其制备方法

说明书

本发明涉及人干细胞生长因子注射液及其制备方法，该注射液能够达到缓释的技术效果，减少患者的服药次数，提高顺应性，该注射液可用于制备治疗贫血、放化疗及骨髓移植术后造血功能的重建和恢复、干细胞体外扩增、基因治疗药物以及在促进表皮细胞新陈代谢、修复衰老和损伤皮肤细胞、延缓肌肤衰老等化妆品方面的应用等。

技术领域

本发明属于医药生物技术领域，具体涉及人干细胞生长因子的注射液。

背景技术

干细胞生长因子（SCGF）是由骨髓微环境中的基质细胞产生的一种酸性糖蛋白，它是一种重要的造血细胞因子，主要作用于早期的造血干细胞和原始造血祖细胞，促进其增殖和分化，在维持造血细胞存活，促进造血细胞增殖和分化，调控各系造血细胞的生长发育中起着重要作用。随着研究的深入，人们发现人干细胞生长因子具有多种生物学功能，可广泛应用于生物医药、精细化工等诸多领域。特别是近年来干细胞迅猛发展，利用干细胞技术进行疾病治疗具有很大的发展前景，尤其是对于血液病的治疗具有极大的意义。骨髓移植和造血干细胞移植已经成为现代医学中治疗血液病的一种主要手段，但是还存在着血液配型困难、干细胞数量少，扩增困难等诸多问题。如果能从患者或与其配型相同的人的其他组织和器官中分离出成体干细胞，在体外实现造血细胞的定向分化，快速扩增，这将对与造血干细胞移植具有重大的意义。但天然的可溶型SCF在人体和动物体内含量甚微，在血液中的浓度为3.3ng/ml，故不可能从天然组织中分离纯化足够量样品，进行实验室和临床应用研究。蛋白与多肽在很多治疗方面都是理想的药物，然而这些有益的效用最终可能受限于传递蛋白的困难。在口服和透皮给药中，其生物利用度通常很低，并且半衰期短。将蛋白和多肽类药物制备成缓释制剂可以减少使用频率，提高患者的顺应性。目前国际上注射缓释系统主要有微球、 脂质体和植入剂。对蛋白和多肽类药物，由生物可降解材料制备的微球是相当理想的载药系统。

对于蛋白类药物而言，复杂的工艺、剧烈的条件都可能导致蛋白活性的丧失。目前市场未见具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的注射液。

发明内容

本发明目的是提供一种具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列的注射液，申请人意外的发现，当采用特定种类和比例的PEG 和SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列得到的注射液具有良好的稳定性，具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列（该序列是申请人于2012年1月17日申请的、申请号为201210016142.8的发明专利中请求保护的序列，在此将该专利的内容全部引入本申请中，具体的制备和保藏不再重复叙述）。

一种SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列注射液，包括SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列、人血清蛋白、柠檬酸盐缓冲液、氯化钠和PEG，其pH至4.5-6.5。

其中，所述PEG为PEG400、600、800，优选PEG600，用量为10-20%（w/v），所述SEQ IDNO.1所示的核苷酸序列为1-3 mol/L，柠檬酸盐含量维持pH至4.5-6.5，优选5.5，氯化钠的用量为维持离子强度在0.1-0.3 mol/L，人血清蛋白（w/v）在3-5%。

本发明的注射液可以按下述方法制备：

(1)将注射用水用柠檬酸盐调节pH至4.5-6.5，加入人血清蛋白，搅拌；

(2) 将SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列步骤1的溶液中，加入PEG，搅拌混合均匀，2-5℃放置10小时，加入氯化钠，使溶液离子强度在0.1-0.3 mol/L；

(3) 再用柠檬酸盐调节pH至4.5-6.5，得到注射液。

本发明涉及的人干细胞生长因子注射液具有以下有益效果：

(1)提高生物利用度，也可在维持同等药效时降低给药量，从而减少服用药物给患者带来的副作用；

(2)产品质量稳定，适合大规模生产应用。