[发明专利]多物种成分实时荧光PCR联合检测方法在审
| 申请号： | 201510300666.3 | 申请日： | 2015-06-04 |
| 公开（公告）号： | CN104894263A | 公开（公告）日： | 2015-09-09 |
| 发明（设计）人： | 胡军;孙丽君;李元;张海祥 | 申请（专利权）人： | 陕西瑞奇生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 710075 陕西省西安*** | 国省代码： | 陕西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 物种 成分 实时 荧光 pcr 联合 检测 方法 | ||
1.一种同时测定产品中多物种成分的实时荧光PCR联合检测方法，其特征在于：根据线粒体DNA上物种间基因多态性的差异设计各物种特异性的引物，并将反应条件优化到同一体系，即可以在一个PCR体系中同时对多种物种成分进行鉴定，通过加入荧光染料来检测荧光信号，最后用扩增的CT值与内参的对照来确定阴阳性；该方法同时对肉及肉制品中10种以上动物源性成分进行检测。
2.根据权利要求1所述的一种同时测定肉制品中多种动物源成分的实时荧光PCR联合检测方法，其特征在于：所述实时荧光PCR法包含的10个以上物种的特异性引物和1个内参引物的序列。
3.根据权利要求1或2所述的一种同时测定肉制品中多种动物源成分的实时荧光PCR联合检测方法，其特征在于：所述实时荧光PCR检测方法对多种动物源成分的检测是在一个PCR反应体系中、同一个反应条件下一次完成的。
4.根据权利要求3所述的一种同时测定肉制品中多种动物源成分的实时荧光PCR联合检测方法，其特征在于：所述实时荧光PCR法的所用荧光染料SYBR Green，但不限于SYBR Green，也可以是Eva Green、LC Green等荧光染料，并通过对溶解曲线的判读分析扩增的特异性。
5.根据权利要求1或4所述的一种同时测定肉制品中多种动物源成分的实时荧光PCR联合检测方法，其特征在于：所述实时荧光PCR法的结果的判读方法：用扩增的CT值与内参的对照来确定阴阳性；无CT值的直接判读为阴性；有扩增CT值的与内参引物扩增CT值进行比较，大于等于7的判读为阴性，小于7的判读为阳性。
6. 根据权利要求5所述的一种同时测定肉制品中多种动物源成分的实时荧光PCR联合检测方法，其特征在于：所述实时荧光PCR法应用于10个以上物种中的任一物种检测。
7.根据权利要求6所述的一种同时测定肉制品中多种动物源成分的实时荧光PCR联合检测方法，其特征在于：所述实时荧光PCR法应用于10个以上物种中的任意混合物种的检测。
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