[发明专利]一种酶生物传感器中的检测配方有效
申请号: | 201510303651.2 | 申请日: | 2015-06-05 |
公开(公告)号: | CN105136874B | 公开(公告)日: | 2018-01-26 |
发明(设计)人: | 熊晶;邱笑违;余占江 | 申请(专利权)人: | 北京乐普医疗科技有限责任公司 |
主分类号: | G01N27/26 | 分类号: | G01N27/26 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司11332 | 代理人: | 巩克栋 |
地址: | 102200 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 生物 传感器 中的 检测 配方 | ||
技术领域
本发明涉及生物传感器技术领域,尤其涉及一种酶生物传感器中的检测配方。
背景技术
在生物体系中,存在着各种各样的物质,它们对生物学过程的各个方面都有十分重要的影响,对这些物质进行快速准确的分析一直是分析科学所追求的目标。发酵工业、临床诊断等应用领域也很迫切需要建立各种快速的、简便的分析方法。
经过长期的发展,生物体系中的分析方法已从传统的化学法发展为生物传感器分析法。电化学酶生物传感器是最早问世的生物传感器,其工作原理为:酶生物传感器是将酶作为生物敏感基元,通过各种物理、化学信号转换器捕捉目标物与敏感基元之间的反应所产生的与目标物浓度成比例关系的可测信号,实现对目标物的定量测定。
发展至今,酶生物传感器已经从第一代酶生物传感器发展到第三代酶生物传感器,目前普遍采用的是第二代酶生物传感器。第二代生物传感器采用了含有电子媒介体的化学修饰层,此化学修饰层不仅能促进电子传递过程,使得响应的线性范围拓宽,电极的工作电位降低,同时,噪声、背景电流及干扰信号均小,且排除了过氧化氢,使得酶生物传感器的工作寿命延长。
根据产生的电信号类别不同,电化学酶生物传感器分为电流型和电位型两类。电流型电化学酶生物传感器主要基于探测生物识别或化学反应中的电活性物质,通过固定工作电极的电位给电活性的电子转移反应提供驱动力,探测电流随时间的变化,该电流直接测量了电子转移反应的速度,反映了生物分子识别的速度,即电流正比于待测物质的浓度。电子媒介体的作用是将酶反应过程中产生的电子从酶反应中心转移到电极表面,使电极产生相应电流变化的分子导电体。
铁氰化钾具有良好的生物兼容性、无毒、较低的氧化还原电位、可逆的电极动力学、能吸附或滞留在电极表面、可与酶的氧化还原辅基快速反应以及可提高相应电流密度等诸多优点,被广泛的应用于如血糖、血酮、尿酸和胆固醇等各类电化学酶生物传感器中。
发明内容
发明人经过大量研究发现,铁氰化钾作为媒介体时性能并不稳定,在储存过程中会逐渐还原变成亚铁氰化钾,当生物传感器施加一定的电压时,亚铁氰化钾又会被氧化成铁氰化钾并释放出电子产生背景电流,导致被测物质测试值比真实值偏高。
有鉴于此,本发明提供一种酶生物传感器中的检测配方,抑制铁氰化钾在储存过程中转化成亚铁氰化钾,减小背景电流的影响,提高检测的准确性。
本发明实施例提供一种酶生物传感器中的检测配方,所述配方由枸橼酸或枸橼酸盐、苹果酸或苹果酸盐、聚丙烯酸或聚丙烯酸盐、铁氰化钾、酶和非反应活性组分组成;
在该配方中,枸橼酸或枸橼酸盐的浓度为0.01%~10%W/V;
苹果酸或苹果酸盐的浓度为0.01%~10%W/V;
聚丙烯酸或聚丙烯酸盐的浓度为0.01%~10%W/V;
铁氰化钾的浓度为0.01%~10%W/V;
酶的浓度为0.1%~70%W/V;
非反应活性组分的浓度为0.1%~70%W/V。
优选的,枸橼酸或枸橼酸盐在配方中的浓度为0.1%~5%W/V。
优选的,苹果酸或苹果酸盐在配方中的浓度为0.1%~5%W/V。
优选的,聚丙烯酸或聚丙烯酸盐在配方中的浓度为0.1%~5%W/V。
优选的,聚丙烯酸或聚丙烯酸盐的分子量范围为2000~10000。
优选的,聚丙烯酸或聚丙烯酸盐的分子量范围为2000~5000。
优选的,铁氰化钾在配方中的浓度为1%~5%W/V。
优选的,所述检测配方的pH范围为5~8,该PH通过添加缓冲液调节。
优选的,所述缓冲液为柠檬酸缓冲液或磷酸缓冲液。
优选的,在该配方中,所述缓冲液的浓度为1%~3%W/V。
与现有技术相比,本发明提供的酶生物传感器中的检测配方具有以下优点和显著的进步:
在酶生物传感器配方中加入枸橼酸(或盐)、苹果酸(或盐)以及聚丙烯酸(或盐)三种物质,可以抑制配方中羧基、羟基的活性,以保护配方中的酶,抑制铁氰化钾被还原为亚铁氰化钾,由于被转化出的亚铁氰化钾较少,当生物传感器施加一定的电压时,亚铁氰化钾被氧化成铁氰化钾释放出电子产生的背景电流相对减小,对检测结果的影响将会减小。
具体实施方式
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