[发明专利]山茱萸药材及其提取物与制剂的质量控制方法及应用

权利要求书

1.一种山茱萸药材及其提取物与制剂的质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤：

(1)采用HPLC-UV法测定山茱萸药材及其提取物与制剂中莫诺苷、马钱苷、当药苷3种环烯醚萜苷类化学成分的含量；

(2)采用HPLC-ELSD法测定山茱萸药材及其提取物与制剂中乌苏酸、齐墩果酸2种三萜酸类化学成分的含量；

(3)分别以步骤(1)所测得环烯醚萜类成分总量、步骤(2)所测得三萜酸类成分总量，或者步骤(1)及步骤(2)所测定得到的环烯醚萜类和三萜酸类成分总量，作为评价指标用于制定评价山茱萸药材及其提取物与制剂品质及进行质量控制的标准；

步骤(1)所述的HPLC-UV测定的步骤为：

(1)供试品溶液的制备

取山茱萸药材或其提取物或制剂适量，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积浓度为40％～80％甲醇，密塞，称定重量，提取60～120min，再称定重量，加体积浓度40％～80％甲醇补足减失的重量，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过后，取续滤液，即得供试品溶液；

(2)对照品溶液的制备

取莫诺苷、马钱苷、当药苷对照品各适量，加体积浓度40％～80％甲醇制成分别含莫诺苷50μg·mL^-1、马钱苷50μg·mL^-1、当药苷20μg·mL^-1的混合对照品溶液；

(3)样品中环烯醚萜苷类活性组分的测定

取步骤(1)制备得到的供试品溶液、步骤(2)制备得到的混合对照品溶液分别注入高效液相色谱仪进行测定，获得色谱图，按外标一点法分别计算莫诺苷、马钱苷、当药苷的质量浓度；

以上所述的高效液相色谱测定的条件为：

色谱柱：反相C18色谱柱；

流动相：以乙腈为A相，体积浓度0.1％甲酸水溶液为B相，梯度洗脱；梯度洗脱程序为：0～20min，10％-17％乙腈，0.1％甲酸水溶液90％-83％；

流速：1mL/min；

检测波长：240nm；

步骤(2)所述的HPLC-ELSD测定的步骤为：

(1)供试品溶液的制备

取山茱萸药材或其提取物或制剂适量，精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入体积浓度为60％～100％甲醇或乙醇，密塞，称定重量，提取60～120min，再称定重量，加体积浓度为60％～100％甲醇或乙醇补足减失的重量，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过后，取续滤液，即得；

(2)对照品溶液的制备

取齐墩果酸、乌苏酸对照品适量，加甲醇制成分别含齐墩果酸100μg·mL^-1、乌苏酸200μg·mL^-1的混合对照品溶液，即得；

(3)样品中三萜酸类活性组分的测定

取步骤(1)制备得到的样品溶液、步骤(2)制备得到的混合对照品溶液分别注入高效液相色谱仪进行测定，获得色谱图，按外标对数方程两点法分别计算齐墩果酸、乌苏酸的质量浓度；

以上所述的高效液相色谱测定的条件为：

色谱柱：反相C18色谱柱，色谱柱填料型号为Hypersil C₁₈；

流动相：体积比为17：83的0.5％乙酸胺水溶液和甲醇；

流速：0.6mL/min；

ELSD检测雾化器温度：80℃，载气流量：2.7L/min。

2.根据权利要求1所述的山茱萸药材及其提取物与制剂的质量控制方法，其特征在于，步骤(3)所述的环烯醚萜类成分总量、三萜酸类成分总量、环烯醚萜类和三萜酸类成分总量为算术总量或者为加权后计算的总量。

3.根据权利要求1所述的山茱萸药材及其提取物与制剂的质量控制方法，其特征在于，步骤(3)所述的用于制定评价样品品质及进行质量控制的标准为3个环烯醚萜类和2三萜酸类成分共5个成分，或者为3个环烯醚萜类成分总量或2个三萜酸类成分总量。

4.根据权利要求1所述的山茱萸药材及其提取物与制剂的质量控制方法，其特征在于，步骤(1)、步骤(2)所述的山茱萸提取物为山茱萸药材的水提取物或者乙醇提取物。