[发明专利]沙糖桔具酪氨酸酶抑制活性的有效部位的制备与用途

说明书

技术领域

本发明涉及沙糖桔具酪氨酸酶抑制活性的有效部位的制备与用途，属于医药和食品技术领域。

背景技术

沙糖桔，又称十月桔，属芸香科橘属类水果。主要产地有：荔浦(修仁镇)、怀集、广宁、四会。沙糖桔果实扁圆形，顶部有瘤状突起，蒂脐端凹陷，色泽橙黄，果壁薄，易剥离。其含有丰富的维生素C、钙、纤维质、少量蛋白质、脂肪以及丰富的葡萄糖、果糖、蔗糖、苹果酸，枸椽酸、柠檬酸以及胡萝卜素、硫胺素，核黄素、尼克酸、抗坏血酸、黄酮类化合物等生物活性成分。

目前对沙糖桔的研究甚少，对其各个部位(果皮、橘络、叶子、果肉)的成分也未见文献报道。我们通过对五种橘属类水果(蜜桔、沙糖桔、柠檬、赣南橙、柚子的果皮、果肉、筋络)提取物进行酪氨酸酶抑制活性筛查，发现沙糖桔橘络具有较强酪氨酸酶抑制活性，为此我们通过高效液相色谱-质谱联用技术，进一步确定其主要成分。

酪氨酸酶为黑色素合成的关键酶，其表达和活性与果蔬的褐变和人体色素沉着性疾病密切相关。因此，酪氨酸酶抑制剂可作为黑色素抑制剂应用于食品、化妆品、医药等领域。

发明内容

本发明的目的在于提供一种具酪氨酸酶抑制活性的的有效部位，是从沙糖桔橘络中提取的由六种多酚类化合物组成的有效部位，包括柚皮芸香苷-4'-葡萄糖苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、枸橘苷和槲皮素-7，3'，4'-葡萄糖苷。

所述有效部位中总酚含量为460-480mg/g，总黄酮含量为14-16mg/g。

所述有效部位中总酚含量为472.68mg/g，总黄酮含量为14.63mg/g。

所述有效部位中6种化合物的含量分别为3.2％，28.6％，2.6％，26.4％，20.3％，2.5％。

本发明的另外一个目的是提供所述酪氨酸酶抑制剂活性化合物及其有效部位的制备方法，其特征在于，通过以下步骤实现：

(1)25g沙糖橘橘络加入到500mL的95％(v/v)乙醇中，于30℃，超声功率250W的超声波提取30min，提取液减压浓缩至干燥物，称重；

(2)80.0mg干燥物用320mL去离子水溶解得到原料液，依次使用二氯甲烷和乙酸乙酯对原料液萃取两次，萃取剂：原料液＝2：1(v/v)；

(3)分离萃取相，减压浓缩至干燥物，得到有效部位提取物。

本发明的另外一个目的是提供所述的沙糖桔橘络具有酪氨酸酶抑制活性的有效部位在制备抗果蔬酶促褐变抑制剂、制备化妆品美白剂，制备预防和治疗黑色素异常导致的人体色素沉着性疾病、黑色素瘤以及其他需要抑制酪氨酸酶活性的病症的药物中的应用。

本发明从沙糖橘橘络中提取的具有酪氨酸酶抑制活性的有效部位，含有六种黄酮类化合物，可以作为抑制酪氨酸酶活力的活性成分，不加或加入食品添加剂辅料，化妆品辅料或药剂上接受的辅料，按照相应剂型的制备方法制成制剂。

所述的剂型包括固体粉末、水溶液、醇溶液、乳液、面膜、巴布剂、注射液、滴注液、粉针剂、颗粒剂、片剂、冲剂、散剂、口服液、糖衣剂、薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口含剂、颗粒剂、丸剂、膏剂、丹剂、喷雾剂、滴丸剂、崩解剂、口崩剂、微丸等。

本发明从沙糖桔橘络中提取得到具有酪氨酸酶抑制活性的有效部位，是含有六种多酚类化合物的组合物，该有效部位比其他橘属类水果提取物具有更强的活性，制成相应制剂易于质量控制，可在果蔬酶促褐变抑制剂、化妆品美白剂、预防和治疗黑色素异常导致的人体色素沉着性疾病、黑色素瘤以及其他需要抑制酪氨酸酶活性的病症的药物中的应用。

附图说明

图1为沙糖橘具有酪氨酸酶抑制活性的有效部位提取物的UPLC/Q-TOF-MS紫外及总离子流谱图；(a)：UV色谱图；(b)：低碰撞能量总离子流图；(c)：高碰撞能量总离子流图。

图2为沙糖橘具有酪氨酸酶抑制活性的有效部位提取物质谱图及分子断裂分析示意图；图(a)～(f)分别为色谱峰1～6对应的质谱图和化合物分子结构。

图3总酚测定芦丁标准曲线。

图4总黄酮测定芦丁标准曲线。

具体实施方式

下面将结合实施例进一步详细说明本发明的实质内容和有益效果，这些实施例仅用于说明本发明而非对本发明的限制。此外，在阅读了本发明讲授的内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

实施例1沙糖橘橘络提取物的制备