[发明专利]用于检测中药口服液体制剂中乳杆菌的培养基和检测方法有效
申请号: | 201510308356.6 | 申请日: | 2015-06-08 |
公开(公告)号: | CN104946724B | 公开(公告)日: | 2017-12-05 |
发明(设计)人: | 丁勃;国明;凌霄;刘广桢;徐晓洁;胡文宏 | 申请(专利权)人: | 山东省食品药品检验研究院 |
主分类号: | C12Q1/04 | 分类号: | C12Q1/04 |
代理公司: | 济南泉城专利商标事务所37218 | 代理人: | 李桂存 |
地址: | 250101 山东省济南市高新技术*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 用于 检测 中药 口服 液体 制剂 杆菌 培养基 方法 | ||
1.一种用于检测中药口服液体制剂中乳杆菌的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)制备乳杆菌增菌培养基,为液体培养基,用于乳杆菌的前增菌培养;其成分为:蛋白胨5.0g、酵母浸出粉4.0g、葡萄糖10.0g、蔗糖、10.0g、磷酸氢二钾1.0g、硫酸镁0.3g、聚山梨酯80 5.0g、山梨酸钾3g、水1000mL;
采用以下方法制成:上述成分中除葡萄糖和蔗糖外,煮沸溶解,然后加入葡萄糖和蔗糖溶解后,摇匀,调节pH值5.5~6.0,分装,115℃,30min灭菌;
(2)制备乳杆菌琼脂培养基,为固体琼脂培养基,用于增菌液的划线培养,其成分为:蛋白胨10.0g、葡萄糖5.0g、蔗糖5.0g、氯化钠3.0g、酵母浸出粉5.0g、L-胱氨酸1.0g、磷酸氢二钾1.0g、琼脂17g、山梨酸钾3g、水1000mL;
采用以下方法制成:上述成分中除葡萄糖和蔗糖外,煮沸溶解,然后加入葡萄糖和蔗糖溶解后,摇匀,调节pH值5.5~6.0,分装,115℃,30min灭菌,倾注平皿;
(3)取供试品,接种至乳杆菌增菌培养基中,37℃±1℃,厌氧,振荡培养18~24小时,振摇速度100~150r/min;
(4)取上述培养物,划线接种至乳杆菌琼脂培养基中,37℃±1℃,厌氧,培养24~48小时;
(5)如果平皿上出现菌落具有以下特征:灰白色,菌落中心颜色较深,圆形凸起,光滑,边缘整齐,菌落直径1.0~1.5mm,且培养皿散发出乳酸味道,则应挑选2~3个菌落,分别接种于乳杆菌琼脂培养基,37℃±1℃,厌氧,培养24~48小时,取培养物进行革兰染色镜检和适宜的鉴定试验,根据结果判断是否检出乳杆菌;
(6)如果平板上无菌落生长或无典型菌落生长,判产品未检出乳杆菌。
2.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于:所述步骤(3)中,乳杆菌增菌培养基的用量是接种供试品体积的5-10倍。
3.根据权利要求1所述的检测方法,其特征在于:所述供试品最少检验数量如下,
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