[发明专利]细胞培养基及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种细胞培养基，其特征在于，所述细胞培养基含有DMEM培养基、F12培养基、维生素C、胰岛素、硒酸钠、碳酸氢钠、血管内皮生长因子和转化生长因子β信号通路抑制剂；

其中，所述DMEM培养基与F12培养基的体积比为1：1-1：4，所述维生素C的浓度为1-100μg/ml，所述胰岛素的浓度为1-100μg/ml，所述血管内皮生长因子的浓度为5-100ng/ml，所述转化生长因子β信号通路抑制剂的浓度为1-50μM，所述硒酸钠的浓度为1-100μg/L，所述碳酸氢钠的浓度为100-1000mg/L。

2.根据权利要求1所述的细胞培养基，其中，所述DMEM培养基与F12培养基的体积比为1：1-1：4，所述维生素C的浓度为20-100μg/ml，所述胰岛素的浓度为5-50μg/ml，所述血管内皮生长因子的浓度为5-50ng/ml，所述转化生长因子β信号通路抑制剂的浓度为1-20μM，所述硒酸钠的浓度为1-50μg/L，所述碳酸氢钠的浓度为200-700mg/L。

3.根据权利要求2所述的细胞培养基，其中，所述DMEM培养基与F12培养基的体积比为1：1-1：4，所述维生素C的浓度为50-100μg/ml，所述胰岛素的浓度为10-30μg/ml，所述血管内皮生长因子的浓度为10-30ng/ml，所述转化生长因子β信号通路抑制剂的浓度为5-10μM，所述硒酸钠的浓度为2-30μg/L，所述碳酸氢钠的浓度为400-600mg/L。

4.根据权利要求1-3中任意一项所述的细胞培养基，其中，所述转化生长因子β信号通路抑制剂为牌号为SB431542的抑制剂。

5.根据权利要求1-3中任意一项所述的细胞培养基，其中，所述细胞培养基的pH为7.5-8。

6.一种细胞培养基的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括：

a、将DMEM培养基、F12培养基、硒酸钠、碳酸氢钠、维生素C、胰岛素、血管内皮生长因子和转化生长因子β信号通路抑制剂混合得到混合物W1；

b、将所述混合物W1进行pH的调节制得混合物W2；

c、将所述混合物W2进行灭菌处理制得细胞培养基；

其中，所述DMEM培养基与F12培养基的体积比为1：1-1：4，所述维生素C的浓度为1-100μg/ml，所述胰岛素的浓度为1-100μg/ml，所述血管内皮生长因子的浓度为5-100ng/ml，所述转化生长因子β信号通路抑制剂的浓度为1-50μM，所述硒酸钠的浓度为1-100μg/L，所述碳酸氢钠的浓度为100-1000mg/L。

7.根据权利要求6所述的制备方法，其中，所述DMEM培养基与F12培养基的体积比为1：1-1：4，所述维生素C的浓度为20-100μg/ml，所述胰岛素的浓度为5-50μg/ml，所述血管内皮生长因子的浓度为5-50ng/ml，所述转化生长因子β信号通路抑制剂的浓度为1-20μM，所述硒酸钠的浓度为1-50μg/L，所述碳酸氢钠的浓度为200-700mg/L。

8.根据权利要求7所述的制备方法，其中，所述DMEM培养基与F12培养基的体积比为1：1-1：4，所述维生素C的浓度为50-100μg/ml，所述胰岛素的浓度为10-30μg/ml，所述血管内皮生长因子的浓度为10-30ng/ml，所述转化生长因子β信号通路抑制剂的浓度为5-10μM，所述硒酸钠的浓度为2-30μg/L，所述碳酸氢钠的浓度为400-600mg/L。

9.根据权利要求6-8中任意一项所述的制备方法，其中，所述转化生长因子β信号通路抑制剂为牌号为SB431542的抑制剂。

10.根据权利要求6-8中任意一项所述的制备方法，其中，在步骤b中，所述pH的调节通过碱进行，且所述混合物W2的pH为7.5-8。