[发明专利]一种接种家兔用猪瘟病毒辅助液及其制备方法

权利要求书

1.一种接种家兔用猪瘟病毒辅助液，其特征在于每1000ml磷酸缓冲液中含有以下重量配比的组分：维生素组合6～10g、氨基酸组合3～5g、复方中药多糖10～30g、亚硒酸钠0～10mg；

所述的氨基酸组合包括蛋氨酸、赖氨酸、色氨酸、谷氨酸、甘氨酸和丙氨酸；

所述的维生素组合包括维生素A、维生素D、维生素E和维生素K；

所述的复方中药多糖由云芝、角叉藻、天麻、芍药、桃仁提取得到。

2.如权利要求1所述的一种接种家兔用猪瘟病毒辅助液，其特征在于该辅助液的pH为7.2～7.6。

3.如权利要求1所述的一种接种家兔用猪瘟病毒辅助液，其特征在于所述的磷酸缓冲液由氯化钠6～10g，氯化钾0.05～0.5g，磷酸氢二钠1～1.2g，磷酸二氢钾0.05～0.5g，氯化钙0.05～0.2g，含6个结晶水的氯化镁0.05～0.2g溶于1000ml双蒸水中得到。

4.如权利要求1所述的一种接种家兔用猪瘟病毒辅助液，其特征在于所述的每1000ml磷酸缓冲液中含有以下重量配比的组分：维生素组合7～9g、氨基酸组合3.5～4.5g、复方中药多糖15～25g、亚硒酸钠2～8mg。

5.如权利要求1所述的一种接种家兔用猪瘟病毒辅助液，其特征在于所述的氨基酸组合中含有：蛋氨酸10～15%、赖氨酸20～30%、色氨酸5～20%、谷氨酸10～30%、甘氨酸5～30%和丙氨酸5～30%。

6.如权利要求1所述的一种接种家兔用猪瘟病毒辅助液，其特征在于所述的氨基酸组合中含有：蛋氨酸12～14%、赖氨酸22～26%、色氨酸10～15%、谷氨酸15～25%、甘氨酸10～20%和丙氨酸15～25%。

7.如权利要求1所述的一种接种家兔用猪瘟病毒辅助液，其特征在于所述的维生素组合中含有：维生素A 10～20%、维生素D 15～30%和维生素E 15～45%、维生素K 25～60%。

8.如权利要求1所述的一种接种家兔用猪瘟病毒辅助液，其特征在于所述的维生素组合中含有：维生素A 12～18%、维生素D 20～25%和维生素E 20～35%、维生素K 30～40%。

9.如权利要求1所述的一种接种家兔用猪瘟病毒辅助液，其特征在于所述的复方中药多糖按以下步骤制得：

a、按云芝20～40份、角叉藻10～30份、天麻10～30份、芍药5～20份和桃仁5～20份称取各中药原料，切碎、洗净后用冷水浸泡过夜，再加入原料重量15倍的纯化水，水浴至90℃，并保持在90℃，熬制2小时，熬制过程中每10分钟搅拌一次；

b、弃去a中药渣，收集药液，室温冷却后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收集上清；

c、将b中上清进行醇沉，沉淀得到粗制中药多糖；

d、用灭菌纯化水洗涤c中粗制中药多糖，洗涤后用20倍量的42℃灭菌纯化水进行溶解，溶解后，按通过活性炭柱进行内毒素吸附，收集滤出液；

e、将d中上滤出液通过sevag法除去蛋白；

f、将e中中药多糖进行真空冷冻干燥制得复方中药多糖。

10.一种接种家兔用猪瘟病毒辅助液的制备方法，其特征在于包括以下工艺步骤：

1）磷酸缓冲溶液的配制：称取氯化钠，氯化钾，磷酸氢二钠，磷酸二氢钾，氯化钙，含6个结晶水的氯化镁溶于双蒸水中，无菌条件下通过0.22μm滤膜，过滤除菌备用；

2）复方中药多糖的制备

a、称取云芝份、角叉藻份、天麻份、芍药份和桃仁份，切碎、洗净后用冷水浸泡过夜，再加入原料重量15倍的纯化水，水浴至90℃，并保持在90℃，熬制2小时，熬制过程中每10分钟搅拌一次；

b、弃去a中药渣，收集药液，室温冷却后经10000rpm离心10分钟，弃去沉淀，收集上清；

c、将b中上清进行醇沉，沉淀得到粗制中药多糖；

d、用灭菌纯化水洗涤c中粗制中药多糖，洗涤后用20倍量的42℃灭菌纯化水进行溶解，溶解后，按通过活性炭柱进行内毒素吸附，收集滤出液；

e、将d中上滤出液通过sevag法除去蛋白；

f、将e中中药多糖进行真空冷冻干燥制得复方中药多糖；

3）接种家兔用病毒辅助液配制：按比例称取氨基酸组合、维生素组合、复方中药多糖和亚硒酸钠，溶解于步骤1）制得的磷酸缓冲溶液中，充分混匀，用酸或碱调节pH至7.2～7.6之间，无菌条件下通过0.22μm滤膜，过滤除菌后置4℃保存备用。