[发明专利]一种金核‑量子点卫星结构组装体的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种金核-量子点卫星结构的高产率组装方法，属于分析化学技术领域。

背景技术

量子点（QuantumDots，QDs）是一种由II-VI族或III-V族元素组成的纳米颗粒。量子点的粒径一般介于1～10nm之间，由于电子和空穴被量子限域，连续的能带结构变成具有分子特性的分立能级结构，受激后可以发射荧光。和传统荧光染料相比，QDs具有宽激发、窄发射和高的荧光量子产率。QDs已逐渐取代染料作为一种新型的生物标记材料，广泛应用于细胞成像、免疫荧光技术、活体成像、核酸识别方面，同时在实现高灵敏度、高通量的生物分析和检测方面表现重大前景。

金纳米粒子具有很好的生物相容性，比表面积大。利用其对量子点的淬灭作用，可以构建以荧光为信号的传感器。但目前量子点的组装困难很多，导致组装产率很低，阻碍了其在传感方面的应用。

通过DNA杂交修饰将大粒径的金纳米粒子和量子点组装成核卫星结构，有很好的检测传感应用前景。

发明内容

本发明的目的是提供一种金核-量子点卫星结构的高产率组装方法。

本发明的技术方案，一种金核-量子点卫星结构组装体的制备方法，步骤为：

（1）35nm粒径的金纳米粒子的合成：35nm粒径的金纳米粒子采用种子生长法合成，13nm的金种子采用柠檬酸三钠还原氯金酸的方法合成；

反应用的锥形瓶提前用新配制的王水浸泡24h，用超纯水冲洗至洁净，37℃烘干待用。2mL10mM的氯金酸、38mL超纯水加入洁净的锥形瓶内，加热至沸腾，加入2mL38.8mM的柠檬酸三钠，煮沸20min得到13nm粒径的金种子。

35nm粒径的金纳米粒子的合成：锥形瓶中加入2mL10mM的氯金酸、0.1mL10mM的硝酸银、42.5mL超纯水、2mL13nm粒径的金种子，在搅拌状态下加7.5mL5.3mM的抗坏血酸溶液以30mL/h的速度泵入，充分搅拌20s，静置待用，得到直径35nm粒径的金纳米粒子。

（2）7nm粒径的量子点的准备：7nm的羧基水溶性硫化锌包裹的硒化镉量子点（GdSeZnS）购买于武汉珈源量子点有限公司。

（3）金纳米粒子上DNA-1的修饰：35nm粒径的金纳米粒子采用13nm粒径的金种子生长合成。

35nm粒径的金纳米粒子离心浓缩十倍后用10mMpH7.2的磷酸盐缓冲液重悬，加入巯基化的DNA-1使得终浓度为5μM。DNA-1与金纳米粒子的摩尔比为300:1。室温孵育2h后加NaCl至50mM，之后每隔1h加一次NaCl，至终浓度500mM。溶液老化24h后离心3次去除未结合的DNA-1，10mMpH7.2的磷酸盐缓冲液重悬待用；

DNA-1：5’-CAATAGCCCTTGGATTTTTTTTTTT-SH-3’；

（4）量子点上互补序列DNA-2的修饰：7nm的羧基水溶性硫化锌包裹的硒化镉量子点（GdSeZnS）购买于武汉珈源量子点有限公司。量子点用10mMpH8的硼酸盐缓冲液稀释至100nM，加入氨基化的互补序列DNA-2使得终浓度为0.5μM，加入EDC（1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐）使终浓度达0.5mM，加NHS（N-羟基丁二酰亚胺）使终浓度达0.5mM，放于振荡器上反应2h。超滤去除未结合的DNA-2，用10mMpH7.2的磷酸盐缓冲液重悬待用。

DNA-2：5’-ATCCAAGGGCTATTGTTTTTTTTTT-NH₂-3’；

（5）金核-量子点卫星结构的组装：50μL适配体DNA-1修饰的金纳米粒子与200μL互补序列DNA-2修饰的量子点混合，60℃孵育2h，得金核-量子点卫星结构组装体。

（6）金核-量子点卫星结构组装体的纯化：将组装体用梯度离心纯化，1000rpm离心3min，弃沉淀。将上清3500rpm离心10min，收集沉淀，重悬在10mMpH7.2的磷酸盐缓冲液中。

本发明的有益效果：本发明提供了一种高产率的金核-量子点卫星结构的组装方法，解决了量子点组装困难、产率低的问题，为开发基于量子点组装的荧光传感器铺平了道路。

附图说明

图1是通过核酸杂交形成的金核-量子点卫星结构组装体的透射电镜照片。

具体实施方式

实施例1金核-量子点卫星结构的高产率组装

（1）35nm粒径的金纳米粒子的合成