[发明专利]丙氨酰谷氨酰胺含量紫外分光光度检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及丙氨酰谷氨酰胺含量检测技术领域。

背景技术

丙氨酰谷氨酰胺是肠外营养的一个组成部分，适用于需要补充谷氨酰胺的病人，包括处于分解代谢和高代谢状况的病人。使用时通常是将它加入到其它的氨基酸溶液中，也可以加入到含有氨基酸的输液中。

目前，丙氨酰谷氨酰胺已经能够进行成熟的工业化生产，在丙氨酰谷氨酰胺的实际生产中需要对中间产品进行取样检验，由于工厂的生产批次多，因此待测样品的数量也很多。但是，目前所用的丙氨酰谷氨酰胺检测方法是液相检测法，其检测速度较慢，检测中需要使用有毒的有机溶剂，且检测过程中如果发生断电则会导致整个检测过程作废，也就是说检测过程不可恢复。因此，现有技术中丙氨酰谷氨酰胺的检测方法还存在诸多缺陷。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对上述现有技术的不足，提供一种丙氨酰谷氨酰胺含量紫外分光光度检测方法，该方法的检测时间短，检测过程可恢复，检测过程中仅使用水作为溶剂，具有绿色环保、安全无毒、准确性高的特点。

为解决上述技术问题，本发明所采取的技术方案是：一种丙氨酰谷氨酰胺含量紫外分光光度检测方法，其包含如下步骤：

（1）将丙胺酰谷氨酰胺的标准样品溶解于纯化水中，并制备出不同浓度的标准溶液；

（2）使用紫外分光光度计对所述不同浓度的标准溶液进行检测，根据所得吸光度绘制标准曲线，按照标准曲线并根据朗伯-比尔定律得出线性回归方程；

（3）将待测样品溶解于纯化水中配制成待测溶液，在215纳米的波长下检测待测溶液的吸光度，然后根据步骤（2）所得的线性回归方程计算出待测样品中丙胺酰谷氨酰胺的含量。

作为优选，标准溶液的浓度均在1～500mg/L范围内。

作为优选，检测波长为215纳米。

作为优选，步骤（1）中制备的标准溶液共有5份。

作为优选，标准溶液的浓度范围为20～240mg/L。

采用上述技术方案所产生的有益效果在于：

（1）检测速度快、准确性高：用液相色谱法检测一个样品至少需要半个小时的时间，当样品数量过多时可能影响生产进度；而同样的时间内用本发明方法可以检测至少6个样品，极大地提高了生产效率；

（2）安全环保：使用液相色谱法检测丙氨酰谷氨酰胺的含量时需要用到有毒的有机溶剂，该溶剂对人体有一定危害，检测人员长期接触容易损害健康；而本发明方法仅仅使用水作为溶剂，具有安全无毒、绿色环保的特点；

（3）检测过程可恢复：当发生断电时，使用液相色谱法的检测过程即被打断，来电以后也不可恢复，从而造成检测过程作废，必须重新检测；而使用本发明方法的检测过程可以在来电以后继续进行，节约了检测时间。

具体实施方式

下面结合具体实施方式对本发明作进一步详细的说明。

选用精晶药业股份有限公司生产的丙氨酰谷氨酰胺作为标准样品进行分析，使用的紫外分光光度计是上海天美UV2300Ⅱ型分光光度计，检测波长为215纳米。检测过程如下：

1、标准溶液配制：

20mg/L溶液配制：精密量取丙氨酰谷氨酰胺0.5g，至250ml容量瓶中，加水溶解，定容至刻度，取5ml至500ml容量瓶中，加水定容至刻度，既得。

40mg/L溶液配制：精密量取丙氨酰谷氨酰胺0.1g，至250ml容量瓶中，加水溶解，定容至刻度，取10ml至100ml容量瓶中，加水定容至刻度，既得。

80mg/L溶液配制：精密量取丙氨酰谷氨酰胺0.2g，至250ml容量瓶中，加水溶解，定容至刻度，取10ml至100ml容量瓶中，加水定容至刻度，既得。

160mg/L溶液配制：精密量取丙氨酰谷氨酰胺0.4g，至250ml容量瓶中，加水溶解，定容至刻度，取10ml至100ml容量瓶中，加水定容至刻度，既得。

240mg/L溶液配制：精密量取丙氨酰谷氨酰胺0.6g，至250ml容量瓶中，加水溶解，定容至刻度，取10ml至100ml容量瓶中，加水定容至刻度，既得。

2、检测吸光度：

按上述配制方法配制标准溶液，打开紫外分光光度计，预热30分钟，按照紫外分光光度法的检测标准程序进行操作，依次检测各标准溶液的吸光度，根据吸光度和浓度的关系求得相关系数R和线性方程，结果见下表1：

表1。

为保证结果的准确性，由不同人员再次进行标准溶液的配制和检测，根据吸光度和浓度的关系求得相关系数R和线性方程，结果见下表2：