[发明专利]基于银纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应超灵敏检测甲胎蛋白的方法

权利要求书

1.基于银纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应超灵敏检测甲胎蛋白的方法，其特征在于包括银纳米粒子的合成，银纳米粒子三聚体的组装及结构表征、拉曼信号测试，用银纳米粒子三聚体检测甲胎蛋白；具体步骤如下：

（1）银纳米粒子的合成：进行15nm粒径银纳米粒子的合成；

（2）银纳米粒子三聚体的组装：取三管50mL已浓缩好的15nm粒径银纳米粒子溶胶，分别和50mL巯基修饰的甲胎蛋白的适配体及其互补序列进行偶联，在室温下过夜反应，分别在13000r/min离心15min，弃上清，后用50mL的超纯水分散沉淀，待用；

将 50mL银-适配体、50mL银-互补序列1、50mL银-互补序列2于150mL的5 mM PB缓冲液中，杂交反应12h，组装产物离心15 min，弃上清，后用100mL的超纯水分散，进行TEM和拉曼表征；

适配体：5’-SH-GGCAGGAAGA CAAACAGGAC CGGGTTGTGT GGGGTTTTAA GAGCGTCGCC TGTGTGTGGT CTGTGGTGCT GT-3’；

互补序列1：5’-SH-CCGGTCCTGT TTGTCTTCCT-3’，

互补序列2：5’-SH-GGCGACGCTC TTAAAACCCC A-3’；

（3）甲胎蛋白的检测：将甲胎蛋白加入已组装好的银纳米粒子三聚体中，反应10min，进行拉曼测试。

2.根据权利要求1所述基于银纳米粒子三聚体的表面增强拉曼散射效应超灵敏检测甲胎蛋白的方法，其特征在于甲胎蛋白的检测步骤如下：取100mL的银纳米粒子三聚体，加入1 mL不同浓度的甲胎蛋白，使其终浓度在0-20aM，反应10min，进行拉曼测试。