[发明专利]金银花中环烯醚萜苷类化合物及其制备方法和用途

说明书

技术领域：

本发明属于医药技术领域，涉及金银花中环烯醚萜苷类化合物及其制备方法，本发明还涉及该类新化合物在制备降糖药物中的应用。

背景技术：

糖尿病源于人体内胰岛素分泌不足，由此引发以糖代谢混乱为主的全身性疾病，并伴随机体一系列的并发症，很难治愈，对患者的生活造成严重影响。糖尿病是世界范围的最常见的流行性疾病之一，其死亡率在发达国家仅次于心血管疾病，恶性肿瘤，成为第三位致死病因的疾病。α-糖苷酶抑制剂(例如阿卡波糖)临床上常被用作抗糖尿病药物，它们能改善血管通透性和降低血糖水平。然而，长期使用一些α-糖苷酶抑制剂会对患者造成过重的经济负担，最重要的是其副作用不良反应较大，对人的其他机体功能造成严重损害，例如腹泻等肠道紊乱性疾病。因此有必要寻找新的、安全、有效的抗糖尿病的药物。许多中药通过活血化瘀、消热解毒、补益的作用来改善人的各项机能，达到防治糖尿病的目的。而且中药治疗糖尿病的作用机制、途径，具有多向性，多层面和多靶点的药理特点，有着西药等化学合成药物不可比拟的优势。因此，从中药中寻找疗效确切的降糖天然药物，明确其药效物质基础，进而开发出高效低毒的抗糖尿病新药，已成为目前国内外研究的热点。

金银花为忍冬科植物忍冬(Lonicera japonica)的干燥花蕾或带初开的花，为我国常用中药，具有3000多年的历史。具有清热解毒、凉散风热之功效，主治痈肿疔疮、喉痹、丹毒、热毒血痢、风热感冒、温病发热等症。目前从金银花中报道分离得到多种类型化合物，其中环烯醚萜苷类化合物具有很好降糖效果。因此从金银花中寻找降糖活性好的环烯醚萜苷类化合物具有一定的价值。

发明内容：

本发明的目的旨在从金银花干燥的花蕾中寻找新的降糖前体药物，提供该环烯醚萜苷类化合物的提取、制备方法，并且研究它们的降糖活性和医药用途。本发明的另一个目的在于提供该类化合物的结构鉴定方法。

本发明所述3个新的具有降糖活性环烯醚萜苷类化合物Loniceranan A、Loniceranan B、Loniceranan C，其结构如下所示：

本发明所述新的环烯醚萜苷类化合物的提取、制备方法如下：

取干燥的金银花用水煎煮，合并提取液浓缩得浸膏，浸膏采用大孔吸附柱色谱，以乙醇-水系统0:100～100:1逐渐洗脱，共收集10～15个馏分，经硅胶薄层层析检识，合并为A1～A4,A2(大孔树脂乙醇-水15:85～30:70下洗脱)通过聚 酰胺柱色谱，以纯水进行洗脱，洗脱液经减压蒸馏后得B，B经快速减压柱色谱以二氯甲烷/三氯甲烷-甲醇-水系统50:1:0.01～1:1:0.01梯度洗脱，共得20～40个馏分，通过硅胶薄层板层析检识，合并为C1～C5，C1经ODS柱色谱以甲醇-水系统10:90～100:0梯度洗脱得到20～30个馏分，经分析液相检识，合并为D1～D7，利用HPLC法以乙腈-水为流动相在D2-D5中制备得到化合物1-3。其中，水煎煮提取2～5次，每次6～10小时。所述的乙腈-水的比例为10:90-30:70。

具体地，本发明中所述三个化合物的制备方法如下：

取干燥的金银花花蕾10-15kg用水煎煮提取2～5次，每次6～10小时，药材与水的比例为：1:3～1:5，合并提取液浓缩得浸膏，浸膏采用大孔吸附柱色谱，以乙醇-水系统0:100～100:1逐渐洗脱，共收集10～15个馏分，经硅胶薄层层析检识，合并为A1～A4,A2(300～500g)通过聚酰胺柱色谱,以纯水进行洗脱，洗脱液经减压蒸馏得B，B经快速减压柱色谱以二氯甲烷/三氯甲烷-甲醇-水系统50:1:0.01～1:1:0.01梯度洗脱，共得20～40个馏分，通过硅胶薄层板层析检识，合并为C1～C5，C1经ODS柱色谱以甲醇-水系统10:90～100:0梯度洗脱得到20～30个馏分，经分析液相检识，合并为D1～D7，利用HPLC法以乙腈-水为流动相(10:90-30:70)在D2-D5中制备得到化合物1-3。本发明所述新的环烯醚萜苷类化合物具有较好的降糖活性。

活性试验方法如下：

1.实验材料

1.1 受试品：化合物

1.2 实验酶及来源α-糖苷酶

2.实验方法

2.1 药物处理