[发明专利]具有氨苄青霉素抗性的长双歧杆菌及其制剂的制备与应用

说明书

本发明公开具有氨苄青霉素抗性的长双歧杆菌及其制剂的制备与应用。本发明用人体粪便在抗生素压力下分离得到2株具有耐药性的乳酸菌，并进行了抗生素敏感性实验，以及检测是否存在质粒DNA；采用PCR扩增分析菌株的耐药基因定位情况，探索了乳酸菌耐抗生素的分子机制，并对筛选具有抗性基因乳酸菌进行安全性评价；对筛选的抗性菌株进行验证是否对肠道失调具有调节作用，采用“抗生素型肠道菌群失衡模型”，旨在为临床上使用抗生素引起的腹泻、菌群失调等疾病提供潜在的治疗方法。本发明获得的菌株，当临床再次使用抗生素时，肠道益生菌能够在抗生素压力下存活，而普通的益生菌则不能存活，因此，可为临床上抗生素引起的腹泻提供治疗方法。

技术领域

本发明属于生物医药领域，特别涉及具有氨苄青霉素抗性的长双歧杆菌及其制剂的制备与应用。

背景技术

在人体定居着大量的微生物，其中主要的就是细菌类，正如我们所知道的它能够定居在人体肠道中，形成复杂的群体或者微生态体系。据统计健康成人的肠道栖息着1014个细菌，是人体细胞总数的10～20倍，有多达近500余种细菌，肠道细菌是人体最庞大、最重要的组成部分，平均每1克大便的细菌数量达到10¹²。机体的宿主细胞、肠道微生物和其他微生物构成了一个复杂的系统，相互影响形成了多种生物学效应。

肠道益生菌(Probiotic)是一类与宿主互利共生、有利于宿主健康的肠道细菌。当前，国内外普遍公认的安全性益生菌菌种主要为乳杆菌属Lactobacillus和双歧杆菌属Bifidobacterium，这两类菌可以在健康成年人的肠道菌群中出现。其他用作益生菌的还有链球菌Streptococcus sp.、乳球菌Lactococcus sp.、肠球菌Enterococcus sp.、拟杆菌Bacteroides sp.、芽孢杆菌Bacillus sp.、丙酸菌Propionibacterium sp.及真菌Fungi等。

肠道益生菌成分组成了机体重要功能，负责3个主要功能：抵制病原微生物的定植；提供营养；免疫调节。益生菌能够结合肠道上的位点，抑制病原微生物的结合，这种潜在的机制可能是有益菌能够产生保护效应抵制病原菌，包括竞争营养或者附着位点，产生抑制新城代谢和抗病原菌作用，调节毒素的产生和活性。有益微生物通过提高日常饮食多糖的分解效应和提供维生素，从而有助于为宿主提供营养。许多研究已经证实益生菌能刺激与获得性免疫相关的功能，激活淋巴细胞并刺激抗体生成，能提高机体的特异性及非特异性免疫功能，对腹泻、炎症、心血管疾病、肥胖等都具有潜在应用价值。

由于抗生素能杀死细菌，在疾病的救治中也发挥了不可替代的作用，在医疗领域得到了广泛的应用。但是，长期使用抗生素及抗生素的滥用，使许多人肠道致病细菌获得耐药性，同时也抑制体内的有益菌，使肠道菌群失衡，从而引起疾病的发生。抗生素所致的肠道生态平衡的改变，可能会导致生态系统抗移植性的丢失和肠病原的过度繁殖，耐药性菌株和条件致病菌的过度生长，有益微生物的抑制，改变肠道生物菌群的功能。