[发明专利]一种竹蛏活性八肽及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及一种竹蛏活性八肽，其氨基酸序列为Ala‑Pro‑His‑Asp‑Asp‑Gln‑Asn‑His，ESI/MS检测分子量为933.1Da；通过以下步骤制得：新鲜竹蛏去壳取肉，竹蛏肉洗净后捣碎，进行组织匀浆，匀浆后调节匀浆液pH值备用；在上述匀浆液中加入碱性蛋白酶进行酶解，获取酶解样品，将所得酶解样品进行超滤、G‑25凝胶分离反相高效液相色谱纯化，收集洗脱峰组分并进行氨基酸测序，获得所述竹蛏活性八肽。该竹蛏活性八肽对人前列腺癌PC‑3细胞的最大增殖抑制率可达90％以上，可为抗前列腺癌药物的研究提供理论基础，该竹蛏活性八肽通过生物酶解方式获得，原料来源广泛，成本低，对进一步研究和开发以竹蛏为基础的药物和食品、提高竹蛏的经济价值具有重大意义。

技术领域

本发明涉及生物活性肽领域，尤其涉及一种竹蛏活性八肽及其制备方法和应用。

背景技术

竹蛏又名蛏子王，为海产双壳软体动物，体呈延长形，两壳合抱后呈竹筒状，故有竹蛏之名。竹蛏贝壳光滑，呈黄褐色，有光泽，壳质脆薄，表面突出，背缘与腹缘平行，后端纯圆，呈长方形，生长线明显，长约11厘米。我国南北沿海均有分布，肉味鲜美，鲜食、干制均可。竹蛏肉味甘咸、性寒，入心、肝、肾经；具有补阴、清热、除烦，解酒毒等功效；对产后虚阴、烦热口渴、湿热水肿、痢疾以及醉酒等有一定治疗作用。

活性肽是由两个或两个以上的氨基酸以肽键相连的化合物，在人体内起重要生理作用，发挥生理功能，如：调节体内的水分、电解质平衡；促进伤口愈合；修复细胞、改善细胞代谢，能起到防癌作用等。活性肽一般通过酶解生物活性材料获得，郑惠娜等发现食物蛋白通过蛋白酶酶解方式，可以得到功能多样的活性多肽(《海洋蛋白酶解制备生物活性肽的研究进展》，郑惠娜、章超桦、曹文红，水产科学，2008,27(7)，370)。目前关于蛏类活性肽的研究主要集中于缢蛏，如：雷晓凌等对缢蛏肉的酶解条件进行研究，发现提取得到的糖胺聚糖对体外培养的HL-60细胞均有一定抑制作用，且随着用量增加抑制作用增强(《缢蛏糖胺聚糖的提取分离及其体外抗肿瘤活性的初步研究》，雷晓凌、吴红棉、范秀萍等，药物生物技术，2004,11(3)：146-149)；张永娟等研究发现提取的缢蛏多肽能促进小鼠胸腺和脾脏发育及迟发型变态反应的发生，提高小鼠碳廓清能力及血清溶血素水平(《缢蛏多肽的免疫调节及抗氧化作用》，张永娟、郑惠娜，时珍国医国药，2011,22(5)：1076-1077)。

竹蛏与缢蛏外形不同，食用时风味也稍有不同，目前关于竹蛏酶解多肽的研究还未见报道，因此对竹蛏酶解多肽进行研究，对进一步研究和开发以竹蛏酶解多肽多基础的功能性食品和药物，提高竹蛏的经济价值具有重大意义。

发明内容

本发明所要解决的第一个技术问题是针对现有技术而提供一种具有抗肿瘤活性的竹蛏活性八肽。

本发明所要解决的第二个技术问题是针对现有技术而提供一种上述竹蛏活性八肽的制备方法。

本发明所要解决的第三个技术问题是针对现有技术而提供一种上述竹蛏活性八肽的应用。

本发明解决上述第一个技术问题所采用的技术方案为：一种竹蛏活性八肽，其氨基酸序列为：Ala-Pro-His-Asp-Asp-Gln-Asn-His，ESI/MS检测分子量为933.1Da。

本发明解决上述第二个技术问题所采用的技术方案为：上述竹蛏活性八肽的制备方法，包括以下步骤：

(1)新鲜竹蛏去壳取肉，竹蛏肉洗净后捣碎，按料液比1:1～3加水进行组织匀浆，匀浆后调节匀浆液pH值为8～10.4备用；

(2)在上述匀浆液中加入碱性蛋白酶进行酶解，获取酶解样品，酶解温度为35～50℃，加酶量为300～1200U/g竹蛏肉，酶解时间为2～8h，酶解完成后于95～100℃、10～15min进行灭酶；