[发明专利]一种甲氧檗因测定的方法

说明书

技术领域

本发明属于化学发光技术领域，具体为一种甲氧檗因测定的方法。

背景技术

小分子甲氧檗因是一种新月形的平面生物碱，当与富含A碱基的DNA作用时，一个甲氧檗因分子可特异性的结合四个A碱基。目前，基于甲氧檗因与富含A碱基的DNA的特异性结合，已经建立了多种用于甲氧檗因的检测方法。近年来甲氧檗因测定方法主要有：基于纳米银颗粒的免标记比色方法(Lv ZZ,Wei H,Li BL.Colorimetric recognition of the coralyne-poly(dA)interaction using unmodified gold nanoparticle probes,and further detection of coralyne based upon this recognitionsystem.Analyst.2009,134(8):1647-1651)；基于纳米银颗粒的免标记比色方法对甲氧檗因的检测方法(Xu XW,Wang J,Yang F.Label-free colorimetric detection of small molecules utilizing DNA oligonucleotides and silver nanoparticles.Small.2009,5(23):2669-2672)；光度法(Hou T,Li CX,Wang XZ,Zhao C,Li F.Label-free colorimetric detection of coralyne utilizing peroxidase-like split G-quadruplex DNAzyme.Analytical Methods.2013.5；4671–4674)；双偏振干涉法(Wang Y,Wang J，Yang F.Probing biomolecular interactions with dual polarization interferometry:real-time and label-free coralyne detection by use of homoadenine DNA oligonucleotide.Analytical Chemisty.2012,84(2):924-930)和荧光法(Zhang P,Wang Y,Leng F,Xiong ZH,Huang CZ.Highly selective and sensitive detection of coralyne based on the binding chemistry of aptamer and graphene oxide.Talanta.2013.15；112:117-22)等。但是，这些方法的各有其缺点，本发明利用MoS₂为载体，以异硫氰酸荧光素FITC为标记物，实现了甲氧檗因的测定，具有方法简单、成本低、灵敏度高的优点。

发明内容

本发明目的是提供一种测定甲氧檗因的方法，利用MoS₂为载体，以硫氰酸荧光素FITC为标记物，光二极管诱导化学发光为检测方法，实现甲氧檗因的测定。

技术方案

一种甲氧檗因测定的方法，其特征在于用MoS₂为载体，以硫氰酸荧光素FITC为标记物，光二极管诱导化学发光为检测方法，实现甲氧檗因的测定，测定步骤如下：

(1)MoS₂的制备，制备、储存MoS₂溶液所用的玻璃容器：容量瓶、棕色广口瓶和圆底烧瓶等用王水浸泡后，用二次蒸馏水洗涤干净后，吹干备用。然后，将MoS₂粉体分散到二甲基甲酰胺DMF中，得到MoS₂的DMF溶液。将该溶液在室温下超声。然后离心分离，离心10min得到黑色沉淀。最后，收集沉淀物，经过水洗涤，然后再分散于1mL水中。

(2)异硫氰酸荧光素标记的探针DNA在MoS₂表面组装，将100μL 8μg mL^-1的MoS₂溶液与100μL10nmol·L^-1的异硫氰酸荧光素标记DNA探针溶液混合，室温下反应20分钟；