[发明专利]产具有多种酶活性的枯草芽孢杆菌及其应用

说明书

本发明公开了产具有多种酶活性的枯草芽孢杆菌及其应用。本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BUABN‑01CGMCC No.9754菌株对人类和环境均无害，使用安全；该菌株能够产生具有溶解血栓活性、纳豆激酶活性(溶纤活性)和纤维素酶活性的代谢物，是一种能够产具有多种酶活性的枯草芽孢杆菌。在培养48h后，BUABN‑01菌株发酵液中的溶纤活性为3297.0IU/mL发酵液，纤维素酶活力为0.1IU/mL发酵液，血栓溶解率达到40％以上。枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BUABN‑01CGMCC No.9754培养条件简单、容易保存，适于工业化生产，具有良好的开发应用前景。

技术领域

本发明涉及生物技术领域中产具有多种酶活性的枯草芽孢杆菌及其应用。

背景技术

芽孢杆菌属于厚壁菌门(Firmicutes)，是能形成芽孢(内生孢子)的杆菌，它们对外界有害因子抵抗力强。目前，研究最多的芽孢杆菌有：枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)、蜡样芽孢杆菌(B.cereus)、苏云金芽孢杆菌(B.thuringiensis)、炭疽杆菌(B.anthracis)、嗜碱芽孢杆菌(B.alcalophilus)、解淀粉芽孢杆菌(B.amyloliquefaciens)、地衣芽孢杆菌(B.licheniformis)、短小芽孢杆菌(B.pumilus)、嗜气芽孢杆菌(B.aerophilus)等。其中，枯草芽孢杆菌(B.subtilis)是一种多功能的微生物，在饲料工业、污水处理、生物肥发酵和发酵床制作中具有广泛应用。

目前临床上治疗血栓的药物，都具有一定的局限性，如毒性强、副作用大、生产成本高、价格昂贵及体内半衰期比较短等。微生物具有体积小、结构简单、生长繁殖快、代谢旺盛等特征，如果能找到可以产生具有溶栓活性的代谢物且安全性好的细菌(如枯草芽孢杆菌)，就能开发新一代的溶栓剂或保健食品。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是如何利用微生物制备具有多种酶活性的物质。

为解决上述技术问题，本发明首先提供了一株枯草芽孢杆菌。

本发明所提供的枯草芽孢杆菌是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BUABN-01，其在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心的登记入册编号为CGMCC No.9754。该菌种已于2014年10月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)。

本发明的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BUABN-01 CGMCC No.9754在牛肉膏蛋白胨培养基上菌落生长迅速。菌落表面初期光滑，后期粗糙不透明，白色至污白色，边缘初期光滑后变粗糙。菌株细胞大小为(0.7-0.8)μm×(2-3)μm，着色均匀。培养24小时以上大量形成芽孢。无荚膜，周生鞭毛，能运动。

为解决上述技术问题，本发明还提供了一种菌剂。

本发明所提供的菌剂，它的活性成分是所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BUABN-01 CGMCC No.9754和/或所述枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)BUABN-01CGMCCNo.9754的代谢物。

所述菌剂具有下述1)-4)中的至少一种功能：

1)具有产溶栓活性(溶解血栓活性)的物质的功能；

2)具有产溶纤活性的物质的功能；

3)具有产纳豆激酶活性的物质的功能；

4)具有产纤维素酶活性的物质的功能。