[发明专利]一种百合培养方法

权利要求书

1.一种百合培养方法，其特征在于，所述的百合培养方法包括百合胚无菌培养方法、百合快速组培方法、百合黑暗变温立体育种方法；

所述百合胚无菌培养方法以百合幼胚为外植体在无菌条件下进行胚的离体培养，观察不同百合胚的萌发和生长情况，并选出适合百合胚在无菌条件下萌发/增殖和生根的培养基；

所述百合快速组培方法采用鳞片作为外植体进行诱导后再进行初代培养，将生长最好的愈伤组织切割成适当大小，移栽到最适培养基中，继代培养后移栽组培苗；

所述百合黑暗变温立体育种方法将从鳞茎上剥取的鳞片放到培养箱里，洗净除菌处理后，置于暗光中，在变温条件下培养。

2.如权利要求1所述的百合培养方法，其特征在于，所述百合胚无菌培养方法将不同品种的百合和在不同剂量的培养基中无菌培养，具体包括：

步骤一、胚培养：取授粉后的蒴果，在无菌条件下用75％酒精棉球擦拭表面，再用0.1％的升汞溶液浸泡15min，然后再用无菌水冲洗；在无菌接种箱里将蒴果切开，选取有胚种子剥取种胚，接种到培养基MS+6-BA0.1mg/L+NAA0.2mg/L上，放置到培养室培养；

步骤二、增殖培养：在无菌条件下，将胚培养所得幼苗的鳞片剥离，移植到MS+NAA0.01mg/L+6-BA0～1.0mg/L的增殖培养基上，6～BA浓度分别为0/0.25/0.5/0.75/1.0mg/L；

步骤三、生根培养：将所得种苗接种在MS+6-BA1.0mg/L+2.4-D0.5mg/L+NAA0～1.0mg/L的生根培养基上，NAA的浓度分别为0/0.2/0.5/0.75/1.0mg/L，分为加质量比0.1％的活性炭与不加活性炭两种情况。

3.如权利要求1所述的百合培养方法，其特征在于，所述百合快速组培方法中的继代培养包括：

步骤一、丛生芽的诱导：将继代培养后的愈伤组织接种到不同配比初代培养基上进行培养；

步骤二、增殖继代培养：取培养出来的初生代丛生芽，将茎切成数段，接种到继代培养基上，待腋芽萌发，并于切口处膨大形成愈伤组织，培养若干天；

步骤三、生根培养：将丛生芽切割下来，转入生根培养基中，接种在MS+NAA0.5mg/L或IBA0.5mg/L的培养基中。

4.如权利要求1所述的百合培养方法，其特征在于，百合快速组培方法中，培养基是以MS为基本培养基，附加不同激素构成的；诱导和分化培养基，附加白糖30g/L，生根培养基附加白糖20g/L，优选0.1mg/l NAA和1.0mg/l的BA单独或混合使用。

5.如权利要求1所述的百合培养方法，其特征在于，百合快速组培方法中，根据MS培养基中元素分类，分为以下四种母液：

母液Ⅰ：NH₄NO₃、KNO₃、CaCl₂·2H₂O、MgSO₄·7H₂O、KH₂PO₄；

母液Ⅱ：KI、H₃BO₃、MnSO₄·4H₂O、ZnSO₄·7H₂O、Na₂MoO₄·2H₂O、CuSO₄·5H₂O、CoCl₂·6H₂O；

母液Ⅲ：FeSO₄·7H₂O、Na₂-EDTA·2H₂O；

母液Ⅳ：肌醇、烟酸、盐酸吡哆醇、盐酸硫胺素、甘氨酸。

6.如权利要求1所述的百合培养方法，其特征在于：

母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容；

母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO₄·7H₂O和Na₂-EDTA·2H₂O分别放到蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容。