[发明专利]用于DNA提取的洗涤液及其应用和DNA提取试剂

权利要求书

1.洗涤液在提取DNA上的应用，其特征在于，所述的洗涤液包括盐酸胍、乙二胺四乙酸二钠、三羟甲基氨基甲烷、盐酸和2-丁氧乙醇，pH为6.8-7.2，并在DNA提取过程中加入所述洗涤液，以同时去除多糖和多酚。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述盐酸胍的浓度为1M-5M、乙二胺四乙酸二钠的浓度为1mM-50mM、三羟甲基氨基甲烷的浓度为10mM-100mM、盐酸的浓度为0.1％-1％，2-丁氧乙醇的浓度为5％-20％。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述盐酸胍浓度为3.5M，乙二胺四乙酸二钠浓度为20mM，三羟甲基氨基甲烷浓度为35mM，盐酸浓度为0.6％，2-丁氧乙醇浓度为10％。

4.根据权利要求1至3之一所述的应用，其特征在于，所述的DNA为采用硅胶柱提取法提取的DNA或采用纳米磁微珠提取法提取的DNA；其中

所述洗涤液在硅胶柱的DNA提取方法上的应用，包括以下步骤：

(1)称取一定量的木材样本，液氮碾磨；

(2)加入裂解液和蛋白酶K进行裂解；

(3)离心取上清，加入过柱结合液；

(4)将DNA制备管置于新的2ml离心管中，取步骤3中的溶液并转移至制备管中，12,000×g离心1min；

(5)弃滤液，将制备管置回到原来的2ml离心管中，加入700μl洗涤液，12,000×g离心1min；

(6)弃滤液，将制备管置回到原来的2ml离心管中，加入700μl去盐液，12,000×g离心1min；

(7)重复步骤6；

(8)弃滤液，将制备管置回到原来的2ml离心管中，12,000×g离心1min；

(9)将DNA制备管置于另一洁净的1.5ml离心管中，在制备管膜中央加100μl去离子水，室温静置10min，12,000×g离心1min洗脱DNA，获得基因组；

所述洗涤液在纳米磁微球的DNA提取方法上的应用，包括以下步骤：

(1)称取一定量的木材样本，液氮碾磨；

(2)加入裂解液和蛋白酶K进行裂解；

(3)离心取上清，加入磁珠和结合液；

(4)将离心管置于磁力架上，待上清液澄清后吸弃上清；

(5)加700μl洗涤液，涡旋洗涤1min；

(6)将2ml离心管置于磁力架上，待上清液澄清后吸弃上清；

(7)加700μl去盐液，涡旋洗涤1min；

(8)将2ml离心管置于磁力架上，待上清液澄清后吸弃上清；

(9)重复步骤7-8；

(10)短暂离心后吸弃残余液体，通风橱干燥；

(11)加50-100μl去离子水，用枪吹打混匀后涡旋洗脱5min，获得基因组DNA。

5.根据权利要求1至3之一所述的应用，其特征在于，提取的是苏木科植物中的DNA。