[发明专利]一种西曲瑞克的制备方法

权利要求书

1.一种制备西曲瑞克的固相合成方法，其特征在于包括以下步骤：a) 以氨基树脂为固相载体，通过固相合成法依次偶联西曲瑞克序列中相对应的Fmoc-保护氨基酸，最后一个氨基酸的连接采用Ac-D-2Nal-OH，制备得到侧链部分保护或全保护的西曲瑞克肽树脂；b) 使用酸解切肽试剂对所述肽树脂进行切割及侧链去保护。

2.根据权利要求1所述的制备西曲瑞克的方法，其特征在于在a) 步骤中使用肽偶联剂和/或偶联添加剂。

3.根据权利要求1至2之一所述的制备西曲瑞克的方法，其特征在于该方法还包括对产物的纯化步骤。

4.根据权利要求1至3之一所述的制备西曲瑞克的方法，其特征在于固相合成中采用了侧链无保护的Fmoc-D-Cit-OH。

5.根据权利要求1至4之一所述的制备西曲瑞克的方法，其特征在于固相合成法依次偶联的氨基酸为：Fmoc-D-Ala-OH，Fmoc-Pro-OH，Fmoc-Arg(Pbf)-OH，Fmoc-Leu-OH，Fmoc-D-Cit-OH，Fmoc-Tyr(tBu)-OH, Fmoc-Ser(tBu)-OH，Fmoc-D-3Pal-OH，Fmoc-D-Phe(4-Cl)-OH，Ac-D-2Nal-OH。

6.根据权利要求1至5之一所述的制备西曲瑞克的方法，其特征在于所述偶联反应中氨基酸投料量为所投树脂摩尔数的1?4倍，偶联反应温度为0?30 °C。

7.根据权利要求1至6之一所述的制备西曲瑞克的方法，其特征在于固相合成中Ac-D-2Nal-OH偶联反应温度为0?20 °C。

8.根据权利要求2至7之一所述的制备西曲瑞克的方法，其特征在于肽偶联剂是以下中的一种或多种：邻(7-氮杂苯并三唑-1-基）-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯（HATU)，邻(苯并三唑-1-基）-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸酯 (HBTU)，邻(苯并三唑-1-基）-1，1，3，3-四甲基四氟硼酸脲鎓 (TBTU)，六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基-三（二甲基氨基）鏻（BOP)，六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基-三-吡咯烷基鏻(PyBOP) ,N,N_双(2-氧代-3-噁唑烷基）膦酰二氯（BOP-C1),六氟磷酸溴-三-吡咯烷基鏻（PyBroP)，氯甲酸异丁酯（IBCF)，1，3-二环己基碳二亚胺（DCC)，1，3-二异丙基-碳二亚胺（DIC)，l-( 二甲基氨基丙基）-3_乙基碳二亚胺盐酸盐（WSCDI)，N-乙氧基羰基-2-乙氧基-1，2-二氢喹啉（EEDQ)，氯甲酸异丙酯（IPCF)，2-(5-降冰片烯-2，3-二甲酰亚胺基）-1，1，3，3-四甲基四氟硼酸脲鎓（TNTU)，丙基膦酸酐（PPAA)和2-琥珀酰亚胺基-1,1, 3, 3-四甲基四氟硼酸脲鎓（TSTU)；肽偶联添加剂选自1-羟基-1H-苯并三唑（HOBt), 6-氯-1-羟基-1H-苯并三唑(6-Cl-HOBt), 3-羟基-1,2,3-苯并三嗪-4(3H)-酮 (HOOBt), 2-肟氰乙酸乙酯（Oxyma），1-羟 基-7-氮杂苯并三唑（HOAt)；一种优选的偶联剂是1，3-二异丙基-碳二亚胺（DIC)，偶联反应时间为0.5?4 小时。

9.根据权利要求1至8之一所述的制备西曲瑞克的方法，其特征在于脱去Fmoc使用体积比5-30%六氢吡啶的N,N-二甲基甲酰胺溶液, 洗脱时间为15?30分钟。

10.根据权利要求1至9之一所述的制备西曲瑞克的方法，其特征在于步骤b)中所述的酸解切割剂为三氟醋酸的溶液，三氟醋酸的比例为80-97%体积比；0 – 30 °C切肽反应1.5 - 3小时，过滤，滤液加入乙醚沉淀，收集沉淀物，用乙醚洗涤，干燥，获得西曲瑞克粗品。

11.根据权利要求3至10之一所述的制备西曲瑞克的方法，其特征在于产物纯化步骤采用C18或C8柱色谱分离纯化，流动相为0.05%-0.5% 盐酸或磷酸或三氟醋酸的水溶液和乙腈溶液，用液相色谱仪跟踪收集所需要的产品馏分，检测波长为220 nm ; 样品峰合并后换盐以及冷冻干燥得到醋酸西曲瑞克。

12.根据权利要求1至11所述的制备西曲瑞克的方法，其特征在于该方法合成的西曲瑞克中不含[D-Cit(Ac)]-西曲瑞克杂质。