[发明专利]基于鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白的试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种基于鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白的试剂盒，其包括固相支持物、抗体捕获剂、酶标二抗、底物、封闭液、终止液，其特征在于：所述抗体捕获剂为如SEQ ID NO:1所示的鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白。

2.根据权利要求1所述的基于鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒为ELISA试剂盒。

3.根据权利要求2所述的基于鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白的试剂盒，其特征在于：所述的试剂盒中抗体捕获剂为浓度≥4μg/mL的鸭疫里默氏杆菌OmpH 截段重组蛋白。

4.根据权利要求2所述的基于鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白的试剂盒， 其特征在于：所述的试剂盒中酶标二抗为作400倍体积稀释的羊抗鸭IgG-HRP。

5.根据权利要求2所述的基于鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白的试剂盒，其特征在于：所述的封闭液为1％BSA。

6.一种鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白在制备鸭疫里默氏杆菌抗体的诊断试剂中的应用，其特征在于：所述的鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白的氨基酸序列如SEQ IDNO:1所示。

7.一种非诊断目的的用权利要求1~5任一项所述的试剂盒检测鸭疫里默氏杆菌抗体的方法，其特征具体为：

A、将浓度≥4μg/mL的鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白与固相支持物连接，用1％BSA封闭液封闭，洗涤去除未结合的抗原及杂质，得固相抗原；

B、将待检血清作200倍稀释得稀释血清，通过保温反应使所述稀释血清与步骤A所得固相抗原结合形成固相抗原抗体复合物，洗涤去除固相载体上杂质；

C、将酶标二抗羊抗鸭IgG-HRP作400倍体积稀释后与所述固相抗原抗体复合物结合，得抗原—抗体—二抗复合物；

D、在步骤C所得抗原—抗体—二抗复合物加入底物TMB显色液避光显色后，加入2mol/LH₂SO₄终止液终止反应得显色样品液；

E、将步骤D所述显色样品液用酶标仪测OD₄₅₀值，待检血清的OD₄₅₀ 值＞0.35时则为阳性，反之则为阴性。

8.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于：步骤A中所述鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白、步骤B中所述稀释血清及步骤C中所述酶标二抗稀释液的加入量为等体积。

9.根据权利要求7所述的检测方法，其特征在于：步骤A中所述鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白与固相支持物连接的条件为4℃包被过夜；

步骤B中稀释血清的保温反应时间和步骤C中酶标二抗的结合时间均为120min；

步骤D中的TMB底物显色时间为10min。