[发明专利]一种南美白对虾半同胞家系构建方法

说明书

技术领域

本发明涉及对虾家的系选育方法，具体是一种南美白对虾半同胞家系构建方法，属于水产养殖技术领域。

背景技术

南美白产对虾业是我国渔业经济的支柱性产业，每年我国南美白对虾种苗需求量巨大。然而，我国南美白对虾优质亲虾仍主要依靠进口，这严重制约了我国对虾产业的发展。所以，加强南美白对虾优良品种选育，是实现我国南美白产业持续发展的关键。

近年来，美国夏威夷海洋研究所通过家系选育结合综合指数选育法，培育出生长快品系和抗桃拉病南美白对虾品系；法国海洋开发研究院通过家系选育法选育出蓝对虾抗传染性皮下与造血组织坏死病毒品系；澳大利亚通过家系选育法提高了日本对虾的生长速度。可见，采用大规模家系选育是对虾遗传改良的有效方法。在家系选育过程中，准确估计选育性状的遗传参数，是提高育种值预测准确性，加快育种进程的重要保障。而大量构建半同胞家系是遗传力、遗传相关等遗传参数准确估计的必要技术手段。

目前，已报道的南美白对虾家系构建方法有定向交尾技术和人工授精法。其中，定向交尾技术存在交配率低、交尾雄虾难确定、精荚容易脱落等、特别是两个半同胞的建立时间难于同步等问题；传统的人工授精法，采用挤压或刺激雄虾腹部使精荚排除，然后将精荚贴在成熟雌虾第三、第四步足的纳精囊上，这种方法可能对雄虾和雌虾造成伤害，且存在精荚容易脱落、受精率低等问题（Arce S M, Moss S M, Argue B J. Artificial insemination and spawning of Pacific white shrimp, Litopenaeus vannamei: implications for a selective breeding program[J]. Spawning and Maturation of Aquatic Species. Proceedings of the Twenty-Eighth US-Japan Natural Resources Aquaculture Panel. UJNR Technical Report, 2000, 28: 5-8.）。另外，两种方法均难于同时建立多个半同胞。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种南美白对虾半同胞家系构建方法，该方法受精率高，无需人工精荚移殖，不会对雌虾造成伤害，可同时建立多个半同胞家系，将精子通过人工释放于产卵水体中，可避免自然交配导致的不交配或者交配后雌虾精荚脱落的缺陷，在设定的近交系数的前提下可人为地设计交配方案，有效避免所建家系的近交衰退，是一种高效的南美白对虾家系构建方法。

本发明技术方案如下：一种南美白对虾半同胞家系构建方法，采用如下步骤：

（1）成熟亲虾的挑选：家系建立当天，进行亲虾选择，选择体形强壮，附肢健全，体色透明，胃肠饱满，体表光滑，无附着物，规格在35-50克/尾，体长15-18cm，经定期抽检不携带特定病原，且事先在亲虾培育池中按照雌、雄虾分别进行强化培育、性腺已发育成熟的雌、雄虾作为亲虾；其中，雌虾的选择：性腺成熟的雌虾从表面观察生殖腺颜色为红色，每体节卵巢分叶清晰，性腺在第一、二腹节的突起大，卵粒饱满，根据性腺的发育情况判断当天可以产卵的雌虾，选出后分别单独暂养于体积为1立方米的小水槽中；雄虾的选择：观察雄虾第五步足基部的精荚囊饱满，精荚呈乳白色，选出后单独暂养于体积为1立方米的网箱或小水槽中；所述雌、雄虾暂养的养殖水体水环境与亲虾培育池相同，亲虾培育池中，雌、雄虾池水温分别为30±0.5℃、28±0.5℃，盐度均为31±1、溶氧均控制在5mg.L^-1；

（2）亲虾个体的标记与交配方案的设定：雌雄亲虾用眼柄套环进行个体标记，并确定定向交配方案，一般是按一尾雄虾与二至三尾雌虾进行定向交配；

（3）精荚的获得：根据步骤（2）设定的交配方案，挑选一尾成熟的雄虾，记录亲虾套环编号，用大拇指和食指在雄虾第五部步足基部从虾体侧向腹部进行按压，精荚突出即用镊子将精荚取出，按压过程注意操作力度以免雄虾受伤，取完精荚的雄虾，于10ppm的聚维酮碘溶液中消毒1min后，放入原亲虾培育池中备用；

（4）精子的活化：将步骤（3）取得的精荚放入200目筛绢网中，于盛有灭菌的无钙生理盐水烧杯中充分搓洗让精子释放，获得精子释放液；将精子释放液视半同胞家系的构建个数，平均分成2~3份，备用；