[发明专利]温度敏感型载体pBBR1MCS‑2‑Ts2及其应用有效
| 申请号： | 201510340512.7 | 申请日： | 2015-06-18 |
| 公开（公告）号： | CN104894154B | 公开（公告）日： | 2018-03-02 |
| 发明（设计）人： | 江贤章;黄建忠;刘洪娇;周芬;张明亮;祁峰;陶勇 | 申请（专利权）人： | 福建师范大学 |
| 主分类号： | C12N15/66 | 分类号： | C12N15/66;C12N15/63 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人： | 关畅,任凤华 |
| 地址： | 350117 福建省福州*** | 国省代码： | 福建;35 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 温度 敏感 载体 pbbr1mcs ts2 及其 应用 | ||
1.构建重组载体的方法，是将SEQ ID No.1的第1557-2526位所示的DNA片段替换为目的基因表达盒，并保持SEQ ID No.1的其他核苷酸不变，得到的重组DNA即为所述重组载体；
所述目的基因表达盒编码的蛋白质为将SEQ ID No.2所示的蛋白质进行A2)的改造、保持SEQ ID No.2的其它氨基酸残基均不变得到的蛋白质：所述A2)为将SEQ IDNo.2第130位的His突变为Gln；
所述目的基因表达盒中的目的基因为将SEQ ID No.1的第1794-2456位核苷酸所示的DNA分子进行B2)的改造、保持SEQ ID No.1的第1794-2456位核苷酸所示的DNA分子中的其它核苷酸均不变得到的DNA分子；所述B2)为将SEQ ID No.1第2183位的C突变为G；
所述目的基因表达盒中启动所述目的基因表达的启动子为将SEQ ID No.1的第1557-1793位所示的DNA分子进行如下C2)的改造、保持SEQ ID No.1的第1557-1793位核苷酸所示的DNA分子中的其它核苷酸均不变得到的DNA分子：
C2)如下C21)和C22)：
C21)将SEQ ID No.1第1732位的A突变为G；
C22)将SEQ ID No.1第1780位的G突变为T；
所述目的基因表达盒中终止所述目的基因表达的终止子为SEQ ID No.1的第2457-2526位所示的DNA分子。
2.由权利要求1所述方法构建的重组载体。
3.含有权利要求2所述重组载体的重组微生物或重组细胞系。
4.权利要求2所述重组载体在作为温度敏感载体中的应用。
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