[发明专利]netrin‑1蛋白在制备用于肿瘤治疗的药物中的用途

说明书

技术领域

本发明涉及蛋白在肿瘤诊断和治疗中的应用，特别涉及netrin-1蛋白在制备用于肿瘤治疗的药物中的用途。

背景技术

胰导管腺癌(Pancreatic Ductal Adenocarcinoma，PDAC)是最致命的肿瘤之一，在所有的胰腺肿瘤中，胰导管腺癌占到了95％以上的比例。胰导管腺癌病例在发现时多数就已经是晚期肿瘤或者已经发生了远程转移，仅有不足20％的患者能够获得手术治疗的机会，总体的中位生存期不足1年。目前对于胰腺癌的发病机制了解甚少，这也限制了针对性的治疗方案和药物的开发。近年来，对于胰腺癌的分子水平的表达变化以及基因突变，基因组上SNP的大规模分析方兴未艾，随着多种肿瘤模式生物，异体移植模型的应用，对于胰腺癌发生发展相关分子机制的研究也有了长足的进步。多种胰导管腺癌相关的基因突变，如KRAS，p53，CDKN2A，转化生长因子受体(TGFβ)在患者病理组织内被检出，这提示了相应分子对于胰腺导管腺肿瘤发生发展的关键性。基因表达谱的分析则提供了更加广泛跟胰腺癌发生发展过程息息相关分子的表达变化情况。病理组织的表达芯片分析揭示了多达数百个存在明显的表达变化的基因，包括MAPK、hedgehog、Notch在内的多个信号通路也被观察到了表达和磷酸化水平的变化。这些变化向我们展示了胰导管腺癌发生发展中潜在的调控过程，并给新的药物靶标和治疗途径的探索提供了参考。

最新的研究提示了轴突引导通路与胰腺癌的相关性。netrin-1分子作为轴突引导过程中的重要分子，通过受体DCC，Neogenin，UNC5家族成员等分子介导了轴突沿netrin-1浓度梯度的生长和排斥作用。除了参与神经系统的轴突导向以外，netrin-1也在上皮组织来源器官的早期形成和分支发生过程中，发挥重要的功能，通过与受体相互结合，介导上皮组织的粘附和迁移等过程，从而构建器官的正常形态和功能。此外，其受体是自身参与细胞凋亡过程的“依赖型受体”，所以netrin-1与肿瘤的相关性很早就得到了相当的关注，其受体DCC以及UNC5家族部分成员(UNC5A，5B，5C)可以在配体netrin-1缺失时诱导细胞凋亡过程而在存在netrin-1结合时抑制凋亡维持细胞的生存。netrin-1还参与到p53通路的调控过程，p53可以作为转录因子促进UNC5B的表达，从而通过该依赖型受体诱导细胞凋亡过程，netrin-1与UNC5B的结合则可以阻断p53介导的细胞凋亡过程。

ITGB4和Integrin β4是同一种蛋白，只不过ITGB4表示基因，而Integrin β4 表示蛋白。Integrins β4在肿瘤研究较多，但是在PDAC中功能的研究相对较少。Integrin β4在多种肿瘤细胞中表达均上调，如乳腺癌，膀胱癌，结直肠癌和胰腺癌等。并且Integrin β4表达越高，临床预后越差。Integrin β4主要从以下几方面参与肿瘤的发生发展:稳定细胞之间的黏附，促进肿瘤迁移和侵袭，抑制肿瘤细胞凋亡，和促进肿瘤血管的发生。Integrin β4可以调节细胞连接半桥粒结构的稳定性。其下游主要与integrin连接激酶相结合，向细胞核内传递信号。另外，Integrin β4可以与酪氨酸激酶受体相结合，如EGFR、ERBB2、Met和Ron。酪氨酸激酶的激活可以使Integrin β4激活，导致半桥粒的解聚，促进细胞迁移。

早在2003年，Mayra Yebra等第一次证明Integrin α3β1和Integrin α6β4是netrin-1的受体，参与胰腺细胞中netrin-1介导的细胞黏附和迁移。

细胞迁移和侵袭是肿瘤细胞的重要特征。在PDAC细胞中，过表达Integrin β4可以促进EMT，进而促进PDAC细胞的迁移和侵袭。提示Integrin与PDAC的迁移和侵袭相关。过表达Integrins可以激活转录因子AP1，进而增加MMP9的表达水平。目前为止，只有为数不多的几篇报道研究netrin-1在PDAC发生发展中的作用，只是在细胞水平发现netrin-1可以促进PDAC的发生发展，但缺乏动物水平的实验。而且netrin-1在PDAC中的作用受体，下游信号通路，以及netrin-1所调节的效应基因等问题都鲜有研究。对于netrin-1在肿瘤诊断、预防和治疗中的应用，特别是对胰导管腺癌诊断、预防和治疗中的应用目前更是鲜有研究。

发明内容