[发明专利]一种含N-非取代葡萄糖胺硫酸类肝素二糖的分离分析方法

权利要求书

1.一种含N-非取代葡萄糖胺硫酸类肝素二糖的分离分析方法，其特征在于：具体步骤如下：

（1）将胺类离子对试剂溶解于去离子水中，用pH调节试剂调pH值至8-8.8，制得浓度为15mM-45mM的流动相A；

（2）将胺类离子对试剂溶解于体积百分比为80%的乙腈溶液中，用pH调节试剂调pH值至8-8.8，制得浓度为15mM-45mM的流动相B；

（3）将待测的含N-非取代葡萄糖胺硫酸类肝素二糖溶解于去离子水中，配制成浓度为250ng/mL的待测溶液，过滤，过ACQUITY UPLC BEH C18柱：流速为0.1mL/min，洗脱梯度为0-30min：100%-85%流动相A、0%-15%流动相B，30min-50min：85%-75%流动相A、15%-25%流动相B，50min-60min：75%-35%流动相A、25%-65%流动相B；PDA检测器在200nm-600nm全波段检测的条件下检测分离色谱图；

（4）通过质谱检测及紫外检测，分别得到紫外检测峰面积和质谱检测峰面积，计算出离子化效率和质谱峰面积校正因子，再计算出含N-非取代葡萄糖胺硫酸类肝素二糖的百分含量。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的胺类离子对试剂为己胺。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的pH调节试剂为甲酸。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：步骤（4）中的质谱采用高效液相色谱串联电喷雾离子阱飞行时间质谱，设定参数为：负离子模式锥孔电压为-3.5kV，干燥气流速为1.5L/min，heatblock & CDL温度为100℃。