[发明专利]一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法在审
| 申请号： | 201510350580.1 | 申请日： | 2015-06-24 |
| 公开（公告）号： | CN104988217A | 公开（公告）日： | 2015-10-21 |
| 发明（设计）人： | 于录;王超;杨志强;郭娜;汪杨;唐旭东;孟日增;安雅男;张巧丽;施晓晨 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 长春市东师专利事务所 22202 | 代理人： | 张铁生 |
| 地址： | 130062 吉林*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 检测 结核 分枝杆菌 生物 被膜产膜 能力 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法，它包括：
1）提取结核分枝杆菌总RNA，反转录成cDNA；
2）以cDNA为模板，用内参基因16SrRNA的上游引物5’-AAGAAGCACCGGCCAACTAC-3’，下游引物5’- TCGCTCCTCAGCGTCAGTTA -3’；检测基因Rv3519的上游引物5’- GTTCATCCATCATCTGCC -3’，下游引物5’- AAGTCCGCCATGATCTTC -3’；荧光定量PCR检测。
2.权利要求1所述的一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法，其特征在于：所述的荧光定量PCR反应体系为：SYBR?Premix Ex Taq 10μL，正向引物 0.4 μL，反向引物 0.4μL，ROX Reference Dye 0.4μL ，cDNA 模板2μL，dH2O 6.8μL。
3.权利要求1或2所述的一种检测结核分枝杆菌生物被膜产膜能力的方法，其特征在于：所述的荧光定量PCR反应条件为：95℃ 30min ；95℃ 5s，60℃ 30s，40 个循环；熔解曲线：95℃ 15 s，60℃ 1 min，以每秒 0.3℃上升到 95℃。
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