[发明专利]一种蛹虫草液体培养基及蛹虫草的培养方法在审
申请号: | 201510356495.6 | 申请日: | 2015-06-25 |
公开(公告)号: | CN105039467A | 公开(公告)日: | 2015-11-11 |
发明(设计)人: | 郭狄 | 申请(专利权)人: | 中山鼎晟生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P19/40 | 分类号: | C12P19/40;C12R1/645 |
代理公司: | 中山市铭洋专利商标事务所(普通合伙) 44286 | 代理人: | 邹常友 |
地址: | 528437 广东省中*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 虫草 液体 培养基 培养 方法 | ||
1.一种蛹虫草液体培养基,其特征在于,所述的培养基包括由以下含量的各组分组成:
KH2PO41-3g/L,
MgSO41-3g/L,
氮源5-20g/L,
马铃薯200-500g/L,
D-果糖8-15g/L,
琼脂20-50g/L,
碱性氨基酸10-25g/L,
酸性氨基酸8-20g/L,
蚕蛹粉30-50g/L。
2.根据权利要求1所述的所述的一种蛹虫草液体培养基,其特征在于,所述的氮源选自蛋白胨、牛肉膏或酵母膏中的一种或多种。
3.根据权利要求2所述的所述的一种蛹虫草液体培养基,其特征在于,所述的蛋白胨的浓度为7.5-15g/L。
4.根据权利要求1所述的所述的一种蛹虫草液体培养基,其特征在于,所述的D-果糖的浓度为10-12g/L。
5.根据权利要求1所述的所述的一种蛹虫草液体培养基,其特征在于,所述的碱性氨基酸选自精氨酸、赖氨酸或组氨酸中的一种或多种。
6.根据权利要求1所述的所述的一种蛹虫草液体培养基,其特征在于,所述的酸性氨基酸选自谷氨酸或天冬氨酸中的一种或多种。
7.根据权利要求1所述的所述的一种蛹虫草液体培养基,其特征在于,所述的培养基的PH为5-8。
8.采用如权利要求1~7任一所述的蛹虫草液体培养基进行蛹虫草培养的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)摇瓶培养:按KH2PO41-3g/L、MgSO41-3g/L、氮源5-20g/L、马铃薯200-500g/L、D-果糖8-15g/L、琼脂20-50g/L、碱性氨基酸10-25g/L、酸性氨基酸8-20g/L、蚕蛹粉30-50g/L的基础培养基配方进行配养基配制,高压蒸汽灭菌10-30min,在常温下冷却后,装于500ml的广口瓶中,接种蛹虫草菌种后,在无光照且培养温度为25-28℃下,以150-200r/min摇瓶培养7-10d得到发酵液;
(2)虫草素含量测定:步骤(1)中的培养结束后的发酵液,以3000-5000r/min离心10-30min,收集上清液,加水稀释,经0.45um滤膜过滤,取滤液采用HPLC法测定虫草素的含量。
9.根据权利要求8所述的蛹虫草培养的方法,其特征在于,步骤(1)中所述的接种的蛹虫草菌种与培养基的体积比为1:(30-50)。
10.根据权利要求8所述的蛹虫草培养的方法,其特征在于,步骤(1)中在培养第4d时,加入腺嘌1-3g/L及甘氨酸16-40g/L。
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