[发明专利]水杨酸在制备抑制木糖葡萄球菌生物被膜药物中的用途

说明书

本发明公开了水杨酸在制备抑制木糖葡萄球菌生物被膜药物中的用途，属于水杨酸的新医药用途领域。本发明采用木糖葡萄球菌生物被膜体外模型研究水杨酸对木糖葡萄球菌生物被膜的体外干预作用，通过结晶紫法观察发现水杨酸对木糖葡萄球菌生物被膜的形成有显著抑制作用，通过XTT法和激光共聚焦显微镜观察发现水杨酸对成熟的木糖葡萄球菌被膜有明显的杀灭作用。因此，水杨酸对于抑制木糖葡萄球菌或干预木糖葡萄球菌生物被膜有确切的功效，能将其应用于制备抑制木糖葡萄球菌或杀灭木糖葡萄球菌生物被膜的药物。

技术领域

本发明涉及水杨酸新医药用途，尤其涉及水杨酸在制备抑制木糖葡萄球菌或干预木糖葡萄球菌生物被膜的药物中的应用，属于水杨酸新医药用途领域。

背景技术

木糖葡萄球菌是一种血浆凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)。此菌广泛分布于自然界，以往认为是非致病菌。近几年，血浆凝固酶阴性葡萄球菌被认为是形成奶牛乳房炎的新兴病原菌。奶牛乳房炎是对奶业危害十分严重的疾病之一，也是导致奶牛淘汰的第三大疾病。引起奶牛乳房炎不易治愈和反复发作的最有说服力的说法就是其有很强的生物被膜(Biofilm,BF)形成能力。生物被膜是细菌产生的多聚复合物基质将自身包绕，黏附于无活性物体或活体表面，形成的有一定结构的细菌群体；它可以抵抗宿主免疫力和抗生素抑菌杀菌作用；生物被膜内细菌容易对抗生素产生广泛的耐药性，造成感染难以治愈，反复发作。

生物被膜状态的细菌与浮游态的细菌在组成结构、生理特性、耐药性等方面差异较大，生物被膜状态的细菌对抗生素及宿主的免疫反应是不敏感的，生物被膜状态的细菌对抗菌剂的耐药性是一个多因素过程，主要是生物被膜中细菌与其浮游态在生理性上有所不同。生物被膜形成后细菌可表达出独特的、不同于浮游菌的生物被膜表型，表达独特的抗性基因。由于细菌生物被膜的耐药机制完全不同于浮游菌，能够抑制浮游态的细菌的抗菌药物不一定能够干预或抑制细菌生物被膜；临床上发现即使反复试验证明有效的药物，但也不能清除生物被膜，导致感染迁延不愈，浪费了大量的人力及物力，形成了公共卫生问题。

水杨酸是植物柳树皮提取物，是一种天然的消炎药。水杨酸能够抑制表皮葡萄球菌，金黄色葡萄球菌等细菌生物被膜的形成，减小它们的毒性和黏附性。并且通过与高分子聚合物结合控制水杨酸的释放度可以很好的抑制生物被膜的形成。水杨酸也可以抑制群体感应系统。迄今为止，未见水杨酸对木糖葡萄球菌生物被膜具有干预或抑制作用的报道。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供水杨酸在制备抑制木糖葡萄球菌或干预木糖葡萄球菌生物被膜药物上的新用途。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

本发明通过体外建立木糖葡萄球菌生物被膜，通过结晶紫法、XTT法和激光共聚焦显微镜考察水杨酸对木糖葡萄球菌生物被膜的干预作用。

通过结晶紫法研究了不同药物浓度下水杨酸对木糖葡萄球菌生物被膜的干预作用，结果表明各个浓度药物的OD值随着药物浓度的增大而减小，呈现负相关。每个浓度的OD值与空白对照存在显著性差异。甲醇对照组和菌液对照组的OD值之间，没有显著性差异，说明水杨酸对木糖葡萄球菌的生物被膜有确切的干预作用。

通过XTT法和激光共聚焦显微镜观察了不同药物浓度下水杨酸对木糖葡萄球菌的细菌活性的影响：XTT法结果表明随着水杨酸药物浓度的加大，抑菌率不断变大，当浓度达到1/2MIC时，水杨酸对生物被膜里的活菌有很好的抑制杀灭作用；通过激光共聚焦显微镜观察，在没有加药的情况下生物被膜形成较厚。而当水杨酸药物浓度达到1/2MIC时，生物被膜明显变薄，细菌活力呈下降趋势，说明在水杨酸药物的作用下，药物可以渗透生物被膜作用到内部，生物被膜内的木糖葡萄球菌明显受到抑制。

综上所述，水杨酸对木糖葡萄球菌有杀菌作用并且对生物被膜有很好的干预或抑制作用。因此，水杨酸可以用于制备抑制木糖葡萄球菌的药物。

本发明公开了一种抑制木糖葡萄球菌的药物组合物，包括：预防或治疗上有效量的水杨酸和药学上可接受的辅料或载体。