[发明专利]一种提高真菌产10-去乙酰巴卡亭III产率的方法

权利要求书

1.一种提高真菌产10-去乙酰巴卡亭III产率的方法，其特征在于，包括以下步骤：在培养基中培养木霉Trichoderma sp.菌株IRB54，当菌丝体发酵培养3天后，进行循环培养，对得到的培养液进行提取分离，得到10-去乙酰巴卡廷III。

2.根据权利要求1所述的提高真菌产10-去乙酰巴卡亭III产率的方法，其特征在于，所述培养基为PDB培养基，其组成为：水1000ml、马铃薯600g、蔗糖280g、pH 6.5-7.0。

3.根据权利要求1所述的提高真菌产10-去乙酰巴卡亭III产率的方法，其特征在于，所述在培养基中培养3天条件为：在25℃条件下培养摇床转速为230r/min-250r/min。

4.根据权利要求1所述的提高真菌产10-去乙酰巴卡亭III产率的方法，其特征在于，所述循环培养条件为：低温10℃培养6小时，25℃培养12小时，30℃培养6小时，所述循环培养的循环次数12次，即12天。

5.根据权利要求1所述的提高真菌产10-去乙酰巴卡亭III产率的方法，其特征在于，所述10-去乙酰巴卡廷III提取分离的的步骤包括：

1)、培养液透过四层纱布过滤，过滤液置于70℃低压旋转蒸发器中进行蒸馏，当液体剩余10ml时，置于体积比为3:2的氯仿/甲醇混合液，并充分混合，备用；

2)、过滤后菌丝体残渣被加石英砂充分研磨，然后将研磨残渣在50℃烘箱中充分干燥，将干燥后的残渣置于体积比为3:2的氯仿/甲醇混合液充分混合，在40℃超声波30分钟，备用；

3)、将1)中的氯仿/甲醇混合液在45℃的条件下进行真空旋转蒸馏除去氯仿和甲醇，获得膏状提取物；

4)提取物被再次溶解在30ml的氯仿中，然后用30ml的水进行抽提，有机相氯仿在40℃条件下通过旋转蒸发被蒸发，产生干燥提取物，即为10-去乙酰巴卡廷III粗提物；

5)该干燥提取物被溶解在5ml的甲醇中，并通过0.45lm的滤膜过滤，过滤后提取物溶液备用于高效液相检测；

6)对菌丝体残渣提取物的氯仿/甲醇混合液，重复步骤1)-步骤5)提取的10-去乙酰巴卡廷III。