[发明专利]一种同时检测食品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法在审
申请号: | 201510365827.7 | 申请日: | 2015-06-29 |
公开(公告)号: | CN104894219A | 公开(公告)日: | 2015-09-09 |
发明(设计)人: | 王永;王法云;周莉;贾广乐;朱海华;关炳峰;任钊;平洋;智军丽;张亚勋;谭静;李栋 | 申请(专利权)人: | 河南省商业科学研究所有限责任公司 |
主分类号: | C12Q1/10 | 分类号: | C12Q1/10;C12Q1/14;G01N33/569 |
代理公司: | 郑州立格知识产权代理有限公司 41126 | 代理人: | 涂连梅 |
地址: | 450002*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 同时 检测 食品 沙门氏菌 金黄色 葡萄球菌 方法 | ||
1.一种同时检测食品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)参照GB 4789对待测食品样品进行稀释,得到1:10的样品匀液;向样品匀液中加入质量浓度为50-65%的氨基三乙酸溶液,样品匀液与氨基三乙酸溶液的体积比为5-7:1,振荡,加入磷酸盐缓冲液或含0.05%吐温-20的磷酸盐缓冲液后离心分层,弃上层;
2)向经步骤1)处理后的样品添加免疫磁珠混合、振荡后,于磁力架上静置分层,弃上层,对下层样品进行洗涤,所述免疫磁珠采用链霉亲和素修饰磁珠偶联生物素标记的沙门氏菌和金黄色葡萄球菌抗体制得;
3)向洗涤后的样品中添加磷酸盐缓冲液,振荡,涂于LB平板,培养观察。
2.根据权利要求1所述同时检测食品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法,其特征在于,步骤2)中,洗涤操作为:加入洗涤液混合均匀后,置于磁力架上静置分层,弃上层,洗涤1-3次,所述洗涤液为磷酸盐缓冲液或含0.05%吐温-20的磷酸盐缓冲液。
3.根据权利要求1所述同时检测食品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法,其特征在于,步骤1)中采用超声波进行振荡,振荡温度为30-37℃,振荡时间为1-15min。
4.根据权利要求1-3任一所述同时检测食品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法,其特征在于,步骤2)中,下层样品与免疫磁珠按照1:1.5-2的体积比进行混合、振荡,振荡温度为25-60℃,振荡时间为15-60min。
5.根据权利要求4所述同时检测食品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法,其特征在于,所述磷酸盐缓冲液和含0.05%吐温-20的磷酸盐缓冲液的浓度均为0.01mol/L。
6.根据权利要求5所述同时检测食品中沙门氏菌和金黄色葡萄球菌的方法,其特征在于,所述待测食品为牛奶、鸡蛋、猪肉或速冻水饺。
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