[发明专利]珠子参皂苷诱导干细胞分化肝细胞及治疗肝病药物的应用

说明书

技术领域

本发明涉及医药技术领域，具体涉及珠子参皂苷诱导干细胞分化肝细胞及治疗肝病药物的应用。

背景技术

我国由于乙型肝炎病毒感染率较高，感染者进而罹患急慢性肝炎、肝纤维化乃至肝硬化、肝癌的事件屡见不鲜，肝脏疾病目前已经成为中国医疗卫生的主要负担之一。肝脏疾病进展到肝硬化等终末期肝病(end-stage liver disease,ESLD)时，通常累及广泛肝实质细胞，肝组织再生能力下降，造成肝功能失代偿并最终导致肝功能衰竭。常规的内科保肝治疗效果不佳，病死率很高。目前，原位肝移植术是治疗ESLD最有效的方法，虽然近期疗效较好，但由于手术复杂、器官来源困难、费用高昂、免疫排斥反应及长期使用免疫抑制剂等因素，使其临床广泛应用受到了一定的限制。近年来干细胞技术的发展为治疗终末期肝病带来了新的希望。干细胞疗法因其简单易行，创伤小而成为关注的焦点。骨髓干细胞移植在治疗急慢性肝功能衰竭、终末期肝病及遗传代谢性肝病等方面有了很大的进展,其在近期疗效、安全性、耐受性等方面获得了肯定，且因其本身的优势(如费用低廉、取材方便、不存在免疫排斥反应等)而越来越受到重视。虽然肝移植是治疗各种终末期肝病的有效方法,但由于供肝来源不足、操作复杂、并发症多、移植后免疫排斥及治疗费用昂贵等原因，限制了临床肝移植的发展。因此，自开展干细胞研究以来，骨髓干细胞(bone marrow stem cells,BMSCs)移植为ESLD患者带来了福音。

干细胞是一类具有自我更新和多向分化潜能的原始细胞。根据其生存阶段可以分为胚胎干细胞和BMSCs。胚胎干细胞具有全能性，可分化为体内所有的组织细胞，但是，干细胞的定向分化是在细胞内外因素的共同作用下完成的，细胞-细胞间的相互作用及某些生长因子可促使干细胞向某一方向分化，因此，在体内复杂的微环境中，很难确保其向单一方向分化，研究发现这种全能干细胞移植后有形成肿瘤(如畸胎瘤)的风险，同时又因为伦理问题，限制了其在临床上的发展应用。近年来许多科学家都先后证实BMSCs的分化能力是最接近胚胎干细胞的成体干细胞，可以分化成为心、肝、脑、肌肉、软骨、胰岛等多种体细胞。BMSCs因其来源丰富，自体移植可避免疫排斥反应，不涉及伦理等诸多优点而倍受关注，充分开发利用BMSCs，将为心、肝、脑等重要器官致命性疾病的治疗开辟一条新的道路。Jiang等人研究发现BMSCs可定向诱导分化为肝样细胞，这种细胞具有正常肝细胞的形态和功能特点，可合成白蛋白、甲胎蛋白、尿素等。虽然也有肝干细胞、脐血干细胞等应用于临床治疗ESLD的报道。我国也早在20世纪中叶就已经开展中药对BMSCs的生物学影响研究，应用中药治疗血液病、抗放化疗副作用等取得了很好的临床效果。

珠子参(Panax japlcus var,major)系五加科人参属植物。别名扣子七、钮子七、竹鞭三七、疙瘩七、土三七、盘七、野三七等。民间习用其干燥根状茎入药。其味苦、甘，微寒，归肝、肺、胃经，具有补肺养阴、祛瘀止痛、止血等功效，主治气阴两虚、烦热口渴、虚劳咳嗽、关节痹痛、咳血、吐血、衄血、崩漏及外伤出血等。对其化学成分研究表明，其主要化学成分为皂苷类，分为齐墩果烷型、达玛烷型、甾类，包括珠子参皂苷K1和K2，竹节参苷、20-O-葡萄糖基-人参皂苷Rf、人参皂苷Ro、人参皂苷Kd、Re、Rc、Rb、Rg1、Rb3、Rg2，人参皂苷F1～F3、20(S)-假人参皂苷F11、珠子参皂苷F1～F6、羽叶三七苷、三七苷Sap-3为β-谷甾醇-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷。齐墩果酸-28-0-β-D-毗哺葡萄糖苷、齐墩果酸、β-谷甾醇-3-0-D-毗喃葡萄糖苷、β-谷甾醇等；其次为多糖、倍半萜类以及人体必需微量元素Fe、Cu、Zn、Mn、Ni、Co、Mo等。

珠子参及其主要成分珠子参总皂苷具有较广泛的药理作用，对血液及造血系统、消化系统、免疫系统、肿瘤、心血脑管系统等均有作用。我们研究发现，珠子参有较显著的抗肿瘤活性，证实珠子参能扶持机体正气，恢复或改善机体内环境的稳态，正向调节NK-IL-2轴功能，并通过促胸腺细胞增生分化为成熟T细胞向外周释放，进一步提高机体免疫调节因子水平，促进抗肿瘤效应细胞的活性，以清除或抑制肿瘤的发生发展；能诱发人肝癌细胞株SMMC27721产生典型的凋亡形态与超微结构变化；可使细胞阻滞在G0/G1期，从而阻止细胞向S期转换，干扰细胞周期进程，并显著引起细胞凋亡，降低癌基因c-myc和c-fos表达，增高抑癌基因p53和p21表达。