[发明专利]一种利用磁场促进解淀粉芽孢杆菌高产抗菌肽的方法有效
申请号: | 201510369341.0 | 申请日: | 2015-06-29 |
公开(公告)号: | CN105255973B | 公开(公告)日: | 2019-02-01 |
发明(设计)人: | 姜正军;陈溥言;刘海玉;匡宝晓;王少娟;周文福;别怀周;于海燕 | 申请(专利权)人: | 山东华辰制药有限公司 |
主分类号: | C12P21/02 | 分类号: | C12P21/02;C12M1/42;C12M1/34;C12R1/07 |
代理公司: | 济南金迪知识产权代理有限公司 37219 | 代理人: | 朱家富 |
地址: | 261061 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 磁场 促进 淀粉 芽孢 杆菌 高产 抗菌 方法 装置 | ||
1.一种利用磁场促进解淀粉芽孢杆菌高产抗菌肽的方法,其特征在于,步骤如下:
(1)将活化后的解淀粉芽孢杆菌接种于种子培养基中,经种子培养,制得种子液;
(2)将步骤(1)制得的种子液转接至发酵培养基中,进行初发酵至菌体细胞进入对数生长期后,25℃~35℃、搅拌速度100~220rpm、空气流量0.5~1.0vvm条件下,经连续的电流强度为0.20~1.20A、磁场强度为0.03~0.18T的恒定磁场发酵处理6~18h,然后经后续发酵处理,制得含抗菌肽的发酵液。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的活化,步骤如下:
将菌株接种至活化培养基,25~30℃活化培养15~36h,得到活化后的解淀粉芽孢杆菌。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于,所述活化培养基成分如下:
葡萄糖5~20g/L、酵母浸粉10~20g/L、蛋白胨5~10g/L,pH值6.0~7.0。
4.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中的解淀粉芽孢杆菌来源于中国普通微生物菌种保藏管理中心,菌种编号CGMCC 1.10901。
5.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,种子培养基每升组分如下:
碳源20.0~40.0g,氮源5.0~20.0g,磷酸钾1.0~4.0g,硫酸镁0.5~3.0g,硫酸锰0.001g,pH 6.0~7.0,去离子水定容至1L。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的碳源为葡萄糖或淀粉,所述的氮源为蛋白胨或酵母粉。
7.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中,种子培养条件为:25℃~40℃、100~320rpm条件下,培养18~24h。
8.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,接种量为1%~5%(体积百分比)。
9.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,发酵培养基每升组分如下:
淀粉20.0~40.0g,酵母粉5.0~20.0g,磷酸钾1.0~4.0g,硫酸镁0.5~3.0g,硫酸锰0.001g,pH 6.0~7.0,其余为去离子水。
10.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,初发酵条件为:25℃~35℃、搅拌速度100~220rpm、空气流量0.5~1.0vvm条件下发酵6~10h。
11.如权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中,后续发酵处理条件为:25℃~35℃、搅拌速度100~220rpm、空气流量0.5~1.0vvm条件下发酵4~12h。
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