[发明专利]一种复合菌剂及其水溶肥和应用

权利要求书

1.一种复合菌剂，其特征在于，由如下方法制得：

1)将OD值为3.5～4.0的枯草芽孢杆菌、3.0～4.0的酵母菌、3.5～4.0的胶质芽孢杆菌和3.5～4.0的地衣芽孢杆菌的种子液按体积比1～5:1～5:1～5:1～5混合，得混合种子液；

2)将所述混合种子液在酵母发酵的副产物中进行高密度混合发酵培养，至活菌数总数大于10亿/mL且小于100亿/mL时，停止培养，得所述复合菌剂；所述酵母发酵的副产物为酵母发酵后的液体，其有机质含量为20％～45％，无机氮的含量为1％～6％，无机磷的含量为0.3％～0.8％，无机钾的含量为4.0％～5.5％。

2.根据权利要求1所述的复合菌剂，其特征在于，所述高密度混合发酵培养的条件为：起始0～24小时内，间隔通气，保持在有氧条件发酵，之后的培养过程中，调控发酵液溶解氧5～15％，搅拌器转速150-200r/min，搅拌间隔时间1～3小时，搅拌1～3分钟。

3.根据权利要求1所述的复合菌剂，其特征在于，所述高密度混合发酵培养采用分批补料的培养方式，其中补料碳源为：葡萄糖、甘油、蔗糖、糖蜜其中任一种或几种的混合物；氮源为：硫酸铵、牛肉膏、蛋白胨其中任一种或几种的混合物。

4.根据权利要求1所述的复合菌剂，其特征在于，所述混合种子液的接种量为5-20％。

5.根据权利要求1所述的复合菌剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌、酵母菌、胶质芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌种子液制备包括如下步骤：

1)菌种活化：将枯草芽孢杆菌、酵母菌、胶质芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌的原始菌种分别接种于各自的固体培养基上，酵母菌在温度15～38℃的条件下培养2～6天，枯草芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌在温度15～42℃的条件下培养1～3天，得到活化后的菌种；

2)一级种子培养：将活化后的菌种分别接种于各自的液体培养基中，酵母菌在温度15～38℃，摇床转速100～200r/min的条件下培养2～6天，枯草芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌在温度15～42℃，摇床转速100～200r/min的条件下培养1～3天，至各菌种液体培养基的OD600值位于3.0～4.0之间时停止培养，制得一级种子；

3)二级种子培养：按一级种子培养液的体积比为5～20％，将一级种子分别接种于装有各菌种液体培养基的发酵罐中，酵母菌在温度15～38℃，搅拌速度100～200r/min，通气量0.5～1.5vvm的条件下培养至其OD值为3.0～4.0，枯草芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌在温度15～42℃，搅拌速度为100～200r/min，通气量为0.5～1.5vvm的条件下培养至其OD值为3.5～4.0，制得二级种子，即为所述种子液。

6.根据权利要求5所述的复合菌剂，其特征在于，所述枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌的液体培养基为NA培养基，酵母菌的液体培养基为PDA培养基，胶质芽孢杆菌的液体培养基为钾细菌培养基，其固体培养基为在各自的液体培养基中添加琼脂。

7.一种水溶肥，其特征在于，由如下百分含量的组分组成：磷酸一铵4-8％、尿素3-6％，磷酸二氢钾2-6％，以及权利要求1-6中任一权利要求所述的复合菌剂余量。

8.权利要求1～6中任一权利要求所述的复合菌剂和权利要求7所述的水溶肥在植物培养中的应用。